CAJ | 학술논문

目的:探讨Janus激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT)通路在大鼠肠缺血再灌注(I/R)所致肠损伤中的作用.方法:雄性健康SD大鼠40只,体重230～255 g,随机分为5组(n=8):假手术组(sham组),仅分离肠系膜上动脉(SMA)但不夹闭;肠缺血再灌注组(I/R组),采用阻断SMA 60 min后开放120 min的方法制备肠I/R损伤模型;AG490(JAK特异性抑制剂)组,于夹闭SMA前30 min在大鼠侧腹部皮下注射8 mg·kg-1 AG490,余同I/R组;雷帕霉素(STAT特异性抑制剂)组(RPM组),于夹闭SMA前30 min在大鼠侧腹部皮下注射0.4 mg·kg-1 RPM,余同I/R组;二甲基亚砜组(DMSO组),于夹闭SMA前30 min侧腹部皮下注射2 μmol·kg-1 DMSO,余同I/R组,DMSO系AG490和RPM的溶剂.所有大鼠均于再灌注120 min后取小肠观察肠黏膜形态学变化并行Chiu's评分,同时取肠黏膜组织检测髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及丙二醛(MDA)和乳酸(LD)含量,采集动脉血检测血清二胺氧化酶(DAO)活性及15-F2t-isoprostane、内皮素-1(ET-1)和血栓烷素B2(TXB2)浓度.TUNEL法检测肠上皮细胞凋亡情况并计算凋亡指数;采用Western blotting检测磷酸化的JAK2(p-JAK2)及STAT3(p-STAT3)的表达水平.结果:与sham组比较,其余各组的Chiu's评分和肠黏膜细胞凋亡指数均显著升高(P＜0.05);而I/R组和DMSO组的LD和MDA含量、DAO活性、MPO活性、15-F2t-isoprostane浓度、ET-1浓度及TXB2浓度均显著升高,p-JAK2及p-STAT3蛋白表达量也显著升高,SOD活性显著降低(P＜0.05).与I/R组和DMSO组比较,AG490组和RPM组的DAO活性、MPO活性、肠黏膜上皮细胞凋亡指数、ET-1浓度、p-JAK2及p-STAT3蛋白表达均显著降低,SOD活性则显著升高(P＜0.05).结论:JAK/STAT信号通路的激活参与了肠I/R所致的肠损伤的发生,其作用与促进氧化应激损伤、中性粒细胞的聚集和肠黏膜细胞凋亡有关.
목적:탐토Janus격매/신호전도화전록격활자(JAK/STAT)통로재대서장결혈재관주(I/R)소치장손상중적작용.방법:웅성건강SD대서40지,체중230～255 g,수궤분위5조(n=8):가수술조(sham조),부분리장계막상동맥(SMA)단불협폐;장결혈재관주조(I/R조),채용조단SMA 60 min후개방120 min적방법제비장I/R손상모형;AG490(JAK특이성억제제)조,우협폐SMA전30 min재대서측복부피하주사8 mg·kg-1 AG490,여동I/R조;뢰파매소(STAT특이성억제제)조(RPM조),우협폐SMA전30 min재대서측복부피하주사0.4 mg·kg-1 RPM,여동I/R조;이갑기아풍조(DMSO조),우협폐SMA전30 min측복부피하주사2 μmol·kg-1 DMSO,여동I/R조,DMSO계AG490화RPM적용제.소유대서균우재관주120 min후취소장관찰장점막형태학변화병행Chiu's평분,동시취장점막조직검측수과양화물매(MPO)화초양화물기화매(SOD)활성,이급병이철(MDA)화유산(LD)함량,채집동맥혈검측혈청이알양화매(DAO)활성급15-F2t-isoprostane、내피소-1(ET-1)화혈전완소B2(TXB2)농도.TUNEL법검측장상피세포조망정황병계산조망지수;채용Western blotting검측린산화적JAK2(p-JAK2)급STAT3(p-STAT3)적표체수평.결과:여sham조비교,기여각조적Chiu's평분화장점막세포조망지수균현저승고(P＜0.05);이I/R조화DMSO조적LD화MDA함량、DAO활성、MPO활성、15-F2t-isoprostane농도、ET-1농도급TXB2농도균현저승고,p-JAK2급p-STAT3단백표체량야현저승고,SOD활성현저강저(P＜0.05).여I/R조화DMSO조비교,AG490조화RPM조적DAO활성、MPO활성、장점막상피세포조망지수、ET-1농도、p-JAK2급p-STAT3단백표체균현저강저,SOD활성칙현저승고(P＜0.05).결론:JAK/STAT신호통로적격활삼여료장I/R소치적장손상적발생,기작용여촉진양화응격손상、중성립세포적취집화장점막세포조망유관.