孤儿G蛋白偶联受体hGPCRc的亚细胞定位及组织分布
고인G단백우련수체hGPCRc적아세포정위급조직분포
Subcellular Localization and Tissues Expression Profile of hGPCRc: an Orphan G Protein-Coupled Receptor
  • 万方数据
    生物工程学报 생물공정학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
    2005年 3期 365-369 ,共5页

    袁广胜%潘光堂%吴芳明%韩春光%黄火高%胡明%盛莉%陈静%刘永学

    원엄성%반광당%오방명%한춘광%황화고%호명%성리%진정%류영학

    孤儿G蛋白偶联受体%hGPCRc%组织分布%CHO-K1细胞系%亚细胞定位 孤兒G蛋白偶聯受體%hGPCRc%組織分佈%CHO-K1細胞繫%亞細胞定位
    고인G단백우련수체%hGPCRc%조직분포%CHO-K1세포계%아세포정위
    利用相关生物信息学软件,对从人结肠组织克隆所得某一孤儿G蛋白偶联受体(orphn G protein-coupled receptors,oGPCRs)成员hGPCRc的氨基酸序列进行分析显示,hGPCRc对应的氨基酸序列组成了七个跨膜区段的结构域,具备GPCR的结构特征;然后,将hGPCRc之cDNA与绿色荧光载体pEGFP-N1构建GFP-hGPCRc表达载体,以空白质粒pEGFP-N1作对照,转染CHO-K1细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察到空白质粒pEGFP-N1转染的细胞表达了GFP并均匀分布于整个细胞,而GFP-hGPCRc转染的细胞观察到荧光清晰聚集于细胞膜和各细胞器质膜上,因而hGPCRc蛋白定位于膜上并稳定表达,与软件分析结果相一致;最后,以RT-PCR检测hGPCRc在20周龄胎儿重要组织器官及部分成人组织中的表达情况,结果显示hGPCRc在人心、肾、小脑及结肠等组织均有表达,但在肝、大脑、小肠及肌肉等组织里未检测到表达.该表达谱对于进一步认识hGPCRc在胚胎发育中的作用及生理功能提供了线索.
    이용상관생물신식학연건,대종인결장조직극륭소득모일고인G단백우련수체(orphn G protein-coupled receptors,oGPCRs)성원hGPCRc적안기산서렬진행분석현시,hGPCRc대응적안기산서렬조성료칠개과막구단적결구역,구비GPCR적결구특정;연후,장hGPCRc지cDNA여록색형광재체pEGFP-N1구건GFP-hGPCRc표체재체,이공백질립pEGFP-N1작대조,전염CHO-K1세포,재격광소묘공취초현미경하관찰도공백질립pEGFP-N1전염적세포표체료GFP병균균분포우정개세포,이GFP-hGPCRc전염적세포관찰도형광청석취집우세포막화각세포기질막상,인이hGPCRc단백정위우막상병은정표체,여연건분석결과상일치;최후,이RT-PCR검측hGPCRc재20주령태인중요조직기관급부분성인조직중적표체정황,결과현시hGPCRc재인심、신、소뇌급결장등조직균유표체,단재간、대뇌、소장급기육등조직리미검측도표체.해표체보대우진일보인식hGPCRc재배태발육중적작용급생리공능제공료선색.
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