江西农业大学学报
江西農業大學學報
강서농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS
2005年
5期
753-758
,共6页
叶子坚%刘冲%陈效友%昌增益
葉子堅%劉遲%陳效友%昌增益
협자견%류충%진효우%창증익
结核分枝杆菌%pMSL质粒%绿色荧光蛋白%表达%纯化
結覈分枝桿菌%pMSL質粒%綠色熒光蛋白%錶達%純化
결핵분지간균%pMSL질립%록색형광단백%표체%순화
为了能够利用耻垢分枝杆菌表达和纯化结核分枝杆菌蛋白,构建了大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pMSL.该质粒包括来源于牛型分枝杆菌hsp60基因启动子序列,目的蛋白插入的克隆位点和用于目的蛋白表达和定位进行跟踪的绿色荧光蛋白质(EGFP)基因,在目的蛋白插入位点和EGFP基因之间整合了凝血酶识别位点,便于融合蛋白纯化后目的蛋白与EGFP分离,在EGFP基因后面融合有6个组氨酸的密码子.结果表明,pMSL质粒能够在耻垢分枝杆菌中有效地表达绿色荧光蛋白,通过6个组氨酸尾,利用Ni-NTA亲和层析柱很好地被纯化.
為瞭能夠利用恥垢分枝桿菌錶達和純化結覈分枝桿菌蛋白,構建瞭大腸桿菌-分枝桿菌穿梭質粒pMSL.該質粒包括來源于牛型分枝桿菌hsp60基因啟動子序列,目的蛋白插入的剋隆位點和用于目的蛋白錶達和定位進行跟蹤的綠色熒光蛋白質(EGFP)基因,在目的蛋白插入位點和EGFP基因之間整閤瞭凝血酶識彆位點,便于融閤蛋白純化後目的蛋白與EGFP分離,在EGFP基因後麵融閤有6箇組氨痠的密碼子.結果錶明,pMSL質粒能夠在恥垢分枝桿菌中有效地錶達綠色熒光蛋白,通過6箇組氨痠尾,利用Ni-NTA親和層析柱很好地被純化.
위료능구이용치구분지간균표체화순화결핵분지간균단백,구건료대장간균-분지간균천사질립pMSL.해질립포괄래원우우형분지간균hsp60기인계동자서렬,목적단백삽입적극륭위점화용우목적단백표체화정위진행근종적록색형광단백질(EGFP)기인,재목적단백삽입위점화EGFP기인지간정합료응혈매식별위점,편우융합단백순화후목적단백여EGFP분리,재EGFP기인후면융합유6개조안산적밀마자.결과표명,pMSL질립능구재치구분지간균중유효지표체록색형광단백,통과6개조안산미,이용Ni-NTA친화층석주흔호지피순화.
