CAJ | 학술논문

油松是我国特有的重要乡土针叶树种,开发合适的油松PCR-SSR引物并建立优化的反应体系,是开展油松天然群体和种子园人工群体遗传研究的基础.该研究以油松总DNA为材料,分析了Taq聚合酶、样本浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度以及引物浓度对PCR-SSR扩增结果的影响,筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物12对,建立了稳定的、可重复的油松PCR-SSR最佳反应体系及PCR扩增参数.研究结果表明:在15μL SSR-PCR反应体系中,样本最适宜浓度为30 ng,Mg2+的最适浓度为0.25 mmol/L,dNTP最适浓度为0.2 mmol/L,单引物的最适浓度均为250 nmol/L;Taq聚合酶在15μL反应体系中宜加入0.375 U.统计利用所选12对引物,对辽宁兴城油松种子园内49个建园无性系进行了SSR-PCR反应,通过6%的变性聚丙稀酰胺凝胶电泳检测,每对引物扩增产物在100～250 bp之间的等位谱带数最大为10,最小为5,不同无性系间DNA谱带多态性丰富.油松SSR-PCR引物筛选及反应体系的建立,为今后利用SSR标记技术开展油松种子园的父本分析及选择性受精研究提供了一个标准化程序和强有力的工具.
유송시아국특유적중요향토침협수충,개발합괄적유송PCR-SSR인물병건립우화적반응체계,시개전유송천연군체화충자완인공군체유전연구적기출.해연구이유송총DNA위재료,분석료Taq취합매、양본농도、Mg2+농도、dNTP농도이급인물농도대PCR-SSR확증결과적영향,사선출확증조대청석、다태성봉부적SSR인물12대,건립료은정적、가중복적유송PCR-SSR최가반응체계급PCR확증삼수.연구결과표명:재15μL SSR-PCR반응체계중,양본최괄의농도위30 ng,Mg2+적최괄농도위0.25 mmol/L,dNTP최괄농도위0.2 mmol/L,단인물적최괄농도균위250 nmol/L;Taq취합매재15μL반응체계중의가입0.375 U.통계이용소선12대인물,대료녕흥성유송충자완내49개건완무성계진행료SSR-PCR반응,통과6%적변성취병희선알응효전영검측,매대인물확증산물재100～250 bp지간적등위보대수최대위10,최소위5,불동무성계간DNA보대다태성봉부.유송SSR-PCR인물사선급반응체계적건립,위금후이용SSR표기기술개전유송충자완적부본분석급선택성수정연구제공료일개표준화정서화강유력적공구.