重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2007年
6期
584-587
,共4页
结核分枝杆菌%序贯免疫策略%初免-加强免疫接种策略%抗原Ag85B%H37Ra
結覈分枝桿菌%序貫免疫策略%初免-加彊免疫接種策略%抗原Ag85B%H37Ra
결핵분지간균%서관면역책략%초면-가강면역접충책략%항원Ag85B%H37Ra
目的:初步探讨含结核分枝杆菌Ag85B成熟蛋白的DNA(pTB30m)和结核菌H37Ra序贯免疫小鼠产生的特异性免疫应答.方法:重组质粒pTB30m用碱裂解法制备后进行质量鉴定.用pTB30m肌注初次免疫小鼠2周后,H37Ra皮内加强免疫作为DNA-85B/H37Ra组,同时设定DNA-85B/BCG组、H37Ra组、BCG组及未免疫组.免疫4周或8周后,用ELISA法检测小鼠血清中抗PPD IgG抗体的水平和MTT法检测其脾淋巴细胞的刺激指数(SI).结果:酶切鉴定pTB30m所含外源基因片段大小正确,并且纯度较高.DNA-85B/H37Ra组小鼠血清中抗PPD IgG水平、脾淋巴细胞的SI均显著高于未免疫组(P<0.05);其抗PPD IgG水平稍高于DNA-85B/BCG组、H37Ra组及BCG组,但它们之间无显著性差异(P>0.05);其脾淋巴细胞的SI显著高于H37Ra、BCG组(P<0.05),而与DNA-85B/BCG组比较,仅在4周有显著性差异.在DNA-85B/H37Ra组内,SI在4周显著高于8周(P<0.05),而血清中抗PPD IgG水平8周均显著高于4周(P<0.05).结论:DNA-85B/H37Ra序贯免疫策略可以诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫,初步证明其免疫效果略优于BCG.
目的:初步探討含結覈分枝桿菌Ag85B成熟蛋白的DNA(pTB30m)和結覈菌H37Ra序貫免疫小鼠產生的特異性免疫應答.方法:重組質粒pTB30m用堿裂解法製備後進行質量鑒定.用pTB30m肌註初次免疫小鼠2週後,H37Ra皮內加彊免疫作為DNA-85B/H37Ra組,同時設定DNA-85B/BCG組、H37Ra組、BCG組及未免疫組.免疫4週或8週後,用ELISA法檢測小鼠血清中抗PPD IgG抗體的水平和MTT法檢測其脾淋巴細胞的刺激指數(SI).結果:酶切鑒定pTB30m所含外源基因片段大小正確,併且純度較高.DNA-85B/H37Ra組小鼠血清中抗PPD IgG水平、脾淋巴細胞的SI均顯著高于未免疫組(P<0.05);其抗PPD IgG水平稍高于DNA-85B/BCG組、H37Ra組及BCG組,但它們之間無顯著性差異(P>0.05);其脾淋巴細胞的SI顯著高于H37Ra、BCG組(P<0.05),而與DNA-85B/BCG組比較,僅在4週有顯著性差異.在DNA-85B/H37Ra組內,SI在4週顯著高于8週(P<0.05),而血清中抗PPD IgG水平8週均顯著高于4週(P<0.05).結論:DNA-85B/H37Ra序貫免疫策略可以誘導小鼠產生特異性體液免疫和細胞免疫,初步證明其免疫效果略優于BCG.
목적:초보탐토함결핵분지간균Ag85B성숙단백적DNA(pTB30m)화결핵균H37Ra서관면역소서산생적특이성면역응답.방법:중조질립pTB30m용감렬해법제비후진행질량감정.용pTB30m기주초차면역소서2주후,H37Ra피내가강면역작위DNA-85B/H37Ra조,동시설정DNA-85B/BCG조、H37Ra조、BCG조급미면역조.면역4주혹8주후,용ELISA법검측소서혈청중항PPD IgG항체적수평화MTT법검측기비림파세포적자격지수(SI).결과:매절감정pTB30m소함외원기인편단대소정학,병차순도교고.DNA-85B/H37Ra조소서혈청중항PPD IgG수평、비림파세포적SI균현저고우미면역조(P<0.05);기항PPD IgG수평초고우DNA-85B/BCG조、H37Ra조급BCG조,단타문지간무현저성차이(P>0.05);기비림파세포적SI현저고우H37Ra、BCG조(P<0.05),이여DNA-85B/BCG조비교,부재4주유현저성차이.재DNA-85B/H37Ra조내,SI재4주현저고우8주(P<0.05),이혈청중항PPD IgG수평8주균현저고우4주(P<0.05).결론:DNA-85B/H37Ra서관면역책략가이유도소서산생특이성체액면역화세포면역,초보증명기면역효과략우우BCG.