医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2008年
2期
100-104
,共5页
潘春阳%王克生%王勤婉%韩泽广%张新
潘春暘%王剋生%王勤婉%韓澤廣%張新
반춘양%왕극생%왕근완%한택엄%장신
生长抑制蛋白4%核定位信号%PHD指状结构域%ERK1
生長抑製蛋白4%覈定位信號%PHD指狀結構域%ERK1
생장억제단백4%핵정위신호%PHD지상결구역%ERK1
目的 探索生长抑制蛋白4(inhibitor of growth 4,ING4)的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)和PHD指状结构域(plant homeodomain)在刺激丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)细胞信号通路成员ERK1磷酸化中的作用.方法 通过构建ING4的NLS和PHD结构域突变或缺失重组质粒,将上述质粒分别与ERK1表达载体共转染HEK-293细胞,Western印迹检测ERK1总蛋白和磷酸化ERK1蛋白水平.结果 在HEK-293细胞中,ING4蛋白分别缺失NLS和PHD结构域后,其对MAPK细胞信号通路成员ERK1磷酸化的促进作用均降低,突变ING4的NLS结构域中两个重要位点Lys-Lys(KK)和Arg-Ala-Arg-Ser-Lys(RARSK)并不改变对ERK1激活的能力,但突变ING4 PHD结构域中RKKK位点则改变了调控ERK1磷酸化的能力.结论 ING4的NLS和PHD指状结构域同时参与了刺激MAPK细胞信号通路成员ERK1的激活.
目的 探索生長抑製蛋白4(inhibitor of growth 4,ING4)的覈定位信號(nuclear localization signal,NLS)和PHD指狀結構域(plant homeodomain)在刺激絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)細胞信號通路成員ERK1燐痠化中的作用.方法 通過構建ING4的NLS和PHD結構域突變或缺失重組質粒,將上述質粒分彆與ERK1錶達載體共轉染HEK-293細胞,Western印跡檢測ERK1總蛋白和燐痠化ERK1蛋白水平.結果 在HEK-293細胞中,ING4蛋白分彆缺失NLS和PHD結構域後,其對MAPK細胞信號通路成員ERK1燐痠化的促進作用均降低,突變ING4的NLS結構域中兩箇重要位點Lys-Lys(KK)和Arg-Ala-Arg-Ser-Lys(RARSK)併不改變對ERK1激活的能力,但突變ING4 PHD結構域中RKKK位點則改變瞭調控ERK1燐痠化的能力.結論 ING4的NLS和PHD指狀結構域同時參與瞭刺激MAPK細胞信號通路成員ERK1的激活.
목적 탐색생장억제단백4(inhibitor of growth 4,ING4)적핵정위신호(nuclear localization signal,NLS)화PHD지상결구역(plant homeodomain)재자격사렬원활화단백격매(MAPK)세포신호통로성원ERK1린산화중적작용.방법 통과구건ING4적NLS화PHD결구역돌변혹결실중조질립,장상술질립분별여ERK1표체재체공전염HEK-293세포,Western인적검측ERK1총단백화린산화ERK1단백수평.결과 재HEK-293세포중,ING4단백분별결실NLS화PHD결구역후,기대MAPK세포신호통로성원ERK1린산화적촉진작용균강저,돌변ING4적NLS결구역중량개중요위점Lys-Lys(KK)화Arg-Ala-Arg-Ser-Lys(RARSK)병불개변대ERK1격활적능력,단돌변ING4 PHD결구역중RKKK위점칙개변료조공ERK1린산화적능력.결론 ING4적NLS화PHD지상결구역동시삼여료자격MAPK세포신호통로성원ERK1적격활.
