CAJ | 학술논문

目的:通过逆转录病毒载体转染Foxp3基因到小鼠CD4+CD25-T细胞,以研究体外诱导获得的调节性T细胞对NK细胞免疫活性的调节作用及其机制.方法:携带Foxp3基因的逆转录病毒转染初始CD4+CD25-T细胞,以获得持续性高表达Foxp3的CD4+ T细胞模型.CD4+Foxp3+ T细胞与NK细胞共培养后,用[51Cr]标记的YAC-1细胞检测NK细胞的杀伤毒性.在TGF-β阻断实验中,通过Transwell共培养实验以及向细胞共培养体系加入抗TGF-β抗体,并检测NK细胞杀伤毒性.结果:逆转录病毒转染初始CD4+CD25-T细胞,成功建立了表达Foxp3的CD4+T细胞模型,转染后1周Foxp3阳性表达的T细胞比例为38 0%.CD4+Foxp3+ T细胞在与NK细胞共培养的24 h和48 h后,对NK细胞的细胞毒性杀伤效应的抑制率分别为42.9%和22.7%.在CD4+Foxp3+ T细胞与NK细胞的共培养体系中加入抗TGF-β抗体后,其抑制率分别由原来的42 9%(24 h)、22 7%(48 h)变为3 2%(24 h)、2 1%(48 h).在Transwell共培养实验中与NK细胞直接接触的Foxp3+CD4+T细胞可以诱导NK细胞免疫抑制,而没有直接接触的Foxp3+CD4+T细胞则不能抑制NK细胞的杀伤作用.结论:强制性表达Foxp3的CD4+CD25-T细胞可以在体外发挥免疫抑制作用,可以抑制NK细胞的细胞毒性杀伤作用.转染 Foxp3的CD4+CD25-T细胞对NK细胞发挥作用依赖于细胞之间的直接接触,与转染后T细胞表面表达TGF-β有关.
목적:통과역전록병독재체전염Foxp3기인도소서CD4+CD25-T세포,이연구체외유도획득적조절성T세포대NK세포면역활성적조절작용급기궤제.방법:휴대Foxp3기인적역전록병독전염초시CD4+CD25-T세포,이획득지속성고표체Foxp3적CD4+ T세포모형.CD4+Foxp3+ T세포여NK세포공배양후,용[51Cr]표기적YAC-1세포검측NK세포적살상독성.재TGF-β조단실험중,통과Transwell공배양실험이급향세포공배양체계가입항TGF-β항체,병검측NK세포살상독성.결과:역전록병독전염초시CD4+CD25-T세포,성공건립료표체Foxp3적CD4+T세포모형,전염후1주Foxp3양성표체적T세포비례위38 0%.CD4+Foxp3+ T세포재여NK세포공배양적24 h화48 h후,대NK세포적세포독성살상효응적억제솔분별위42.9%화22.7%.재CD4+Foxp3+ T세포여NK세포적공배양체계중가입항TGF-β항체후,기억제솔분별유원래적42 9%(24 h)、22 7%(48 h)변위3 2%(24 h)、2 1%(48 h).재Transwell공배양실험중여NK세포직접접촉적Foxp3+CD4+T세포가이유도NK세포면역억제,이몰유직접접촉적Foxp3+CD4+T세포칙불능억제NK세포적살상작용.결론:강제성표체Foxp3적CD4+CD25-T세포가이재체외발휘면역억제작용,가이억제NK세포적세포독성살상작용.전염 Foxp3적CD4+CD25-T세포대NK세포발휘작용의뢰우세포지간적직접접촉,여전염후T세포표면표체TGF-β유관.