中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2011年
15期
249-253
,共5页
孙婷婷%赵明%李亚莉%张春花%梁丽%袁文侠%周红杰
孫婷婷%趙明%李亞莉%張春花%樑麗%袁文俠%週紅傑
손정정%조명%리아리%장춘화%량려%원문협%주홍걸
非培养技术%动态变化%微生物群落%普洱茶发酵%同时提取
非培養技術%動態變化%微生物群落%普洱茶髮酵%同時提取
비배양기술%동태변화%미생물군락%보이다발효%동시제취
为建立提取普洱茶发酵样品中微生物DNA的方法.首先比较了3种发酵样品中菌体收集方法,其次改进了omega小量植物DNA提取试剂盒的提取方法,以DNA的纯度、提取率和细菌16S rDNA、真菌β-微管蛋白基因PCR扩增为指标,评价提取DNA质量.实验发现茶样(5 g)加Tween-NaCl缓冲液(50mL),静置30min,超声波振荡10min,离心(10min,12000 r/min)的菌体收集方法和在omega小量植物DNA提取试剂盒中引入液氮研磨、溶菌酶和破壁酶联合裂解细胞的方法提取的DNA纯度好,可以分别扩增出细菌16S rDNA和真菌β-微管蛋白基因.建立了普洱茶发酵样品细菌和真菌DNA同时提取方法,为开展普洱茶固态发酵过程微生物多样性的分子生物学研究奠定了基础.
為建立提取普洱茶髮酵樣品中微生物DNA的方法.首先比較瞭3種髮酵樣品中菌體收集方法,其次改進瞭omega小量植物DNA提取試劑盒的提取方法,以DNA的純度、提取率和細菌16S rDNA、真菌β-微管蛋白基因PCR擴增為指標,評價提取DNA質量.實驗髮現茶樣(5 g)加Tween-NaCl緩遲液(50mL),靜置30min,超聲波振盪10min,離心(10min,12000 r/min)的菌體收集方法和在omega小量植物DNA提取試劑盒中引入液氮研磨、溶菌酶和破壁酶聯閤裂解細胞的方法提取的DNA純度好,可以分彆擴增齣細菌16S rDNA和真菌β-微管蛋白基因.建立瞭普洱茶髮酵樣品細菌和真菌DNA同時提取方法,為開展普洱茶固態髮酵過程微生物多樣性的分子生物學研究奠定瞭基礎.
위건립제취보이다발효양품중미생물DNA적방법.수선비교료3충발효양품중균체수집방법,기차개진료omega소량식물DNA제취시제합적제취방법,이DNA적순도、제취솔화세균16S rDNA、진균β-미관단백기인PCR확증위지표,평개제취DNA질량.실험발현다양(5 g)가Tween-NaCl완충액(50mL),정치30min,초성파진탕10min,리심(10min,12000 r/min)적균체수집방법화재omega소량식물DNA제취시제합중인입액담연마、용균매화파벽매연합렬해세포적방법제취적DNA순도호,가이분별확증출세균16S rDNA화진균β-미관단백기인.건립료보이다발효양품세균화진균DNA동시제취방법,위개전보이다고태발효과정미생물다양성적분자생물학연구전정료기출.
