生物学杂志
生物學雜誌
생물학잡지
JOURNAL OF BIOLOGY
2012年
1期
47-50,58
,共5页
水稻%RNAi%OsNCED3%pFGC5941
水稻%RNAi%OsNCED3%pFGC5941
수도%RNAi%OsNCED3%pFGC5941
水稻OsNCED3基因是水稻抗逆过程中重要的基因之一.以水稻中花10号幼苗为材料,提取基因组DNA.设计引物扩增区段cDNA并引入相应的酶切位点,以基因组DNA作为模板,进行RNAi-OsNCED3顺式和反式目的片段的PCR扩增.将PCR产物连接到pMD19-T载体上,经酶切和PCR检测后进行测序.测序结果表明:RNAi-OsNCED3顺式和反式目的片段均已正确的连接到pMD19-T载体上.然后将RNAi-OsNCED3顺式和反式目的片段通过酶切和连接,连接到含有发夹结构的质粒pFGC5941上.PCR及双酶切结果显示,构建的pFGC5941-OsNCED3即RNAi-OsNCED3载体结构完整.
水稻OsNCED3基因是水稻抗逆過程中重要的基因之一.以水稻中花10號幼苗為材料,提取基因組DNA.設計引物擴增區段cDNA併引入相應的酶切位點,以基因組DNA作為模闆,進行RNAi-OsNCED3順式和反式目的片段的PCR擴增.將PCR產物連接到pMD19-T載體上,經酶切和PCR檢測後進行測序.測序結果錶明:RNAi-OsNCED3順式和反式目的片段均已正確的連接到pMD19-T載體上.然後將RNAi-OsNCED3順式和反式目的片段通過酶切和連接,連接到含有髮夾結構的質粒pFGC5941上.PCR及雙酶切結果顯示,構建的pFGC5941-OsNCED3即RNAi-OsNCED3載體結構完整.
수도OsNCED3기인시수도항역과정중중요적기인지일.이수도중화10호유묘위재료,제취기인조DNA.설계인물확증구단cDNA병인입상응적매절위점,이기인조DNA작위모판,진행RNAi-OsNCED3순식화반식목적편단적PCR확증.장PCR산물련접도pMD19-T재체상,경매절화PCR검측후진행측서.측서결과표명:RNAi-OsNCED3순식화반식목적편단균이정학적련접도pMD19-T재체상.연후장RNAi-OsNCED3순식화반식목적편단통과매절화련접,련접도함유발협결구적질립pFGC5941상.PCR급쌍매절결과현시,구건적pFGC5941-OsNCED3즉RNAi-OsNCED3재체결구완정.