中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2012年
1期
52-57
,共6页
鄢黎%周晓雯%周星%赖永长%罗焕敏
鄢黎%週曉雯%週星%賴永長%囉煥敏
언려%주효문%주성%뢰영장%라환민
大黄酸%神经营养%碱性成纤维细胞生长因子%酪氨酸受体激酶受体%磷脂酰肌醇3激酶
大黃痠%神經營養%堿性成纖維細胞生長因子%酪氨痠受體激酶受體%燐脂酰肌醇3激酶
대황산%신경영양%감성성섬유세포생장인자%락안산수체격매수체%린지선기순3격매
目的 研究大黄酸(RH)对大鼠皮质神经元的营养作用,并初步探讨其相关机制.方法 体外DMEM/F12+ 0.4％ B27培养新生大鼠皮质神经元,应用神经元特异性烯醇化酶(NSE)和微管相关蛋白2(MAP2)免疫细胞化学染色法鉴定神经元.神经元细胞加入RH 2,4和8μmol·L-1作用72 h,计算神经元平均突起长度；或分别同时加入Trk受体拮抗剂K252a 50 nmol· L-和PI3K抑制剂LY294002 10 μmol·L -1测量神经元平均突起长度.MTT法检测细胞存活,并测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测MAP2 mRNA表达.结果 NSE及MAP2免疫荧光染色结果显示,绝大多数细胞呈阳性反应,所培养的细胞90％以上为神经元.MTT和LDH检测结果表明,与溶媒对照组相比,RH2,4和8 μmol· L-1能明显提高神经元存活率(P＜0.01)；平均突起长度明显增加(P＜0.01).与RH8 μmol·L -1组相比,同时加入K252a 50 nmol·L-1或LY294002 10 μmol·L-1,平均突起长度明显缩短(P＜0.01).与溶媒对照组相比,RH 2,4和8μmol·L-1组MAP2 mRNA表达量明显增加(P＜0.01).结论 RH对新生大鼠皮质神经元具有神经营养作用,能促进神经元突起的生长和提高神经元的存活率.RH神经营养作用可能部分通过激活Trk受体,继而激活Ras/PI3 K/PKB通路而发挥的.
目的 研究大黃痠(RH)對大鼠皮質神經元的營養作用,併初步探討其相關機製.方法 體外DMEM/F12+ 0.4％ B27培養新生大鼠皮質神經元,應用神經元特異性烯醇化酶(NSE)和微管相關蛋白2(MAP2)免疫細胞化學染色法鑒定神經元.神經元細胞加入RH 2,4和8μmol·L-1作用72 h,計算神經元平均突起長度；或分彆同時加入Trk受體拮抗劑K252a 50 nmol· L-和PI3K抑製劑LY294002 10 μmol·L -1測量神經元平均突起長度.MTT法檢測細胞存活,併測定培養液中乳痠脫氫酶(LDH)的含量.逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)半定量檢測MAP2 mRNA錶達.結果 NSE及MAP2免疫熒光染色結果顯示,絕大多數細胞呈暘性反應,所培養的細胞90％以上為神經元.MTT和LDH檢測結果錶明,與溶媒對照組相比,RH2,4和8 μmol· L-1能明顯提高神經元存活率(P＜0.01)；平均突起長度明顯增加(P＜0.01).與RH8 μmol·L -1組相比,同時加入K252a 50 nmol·L-1或LY294002 10 μmol·L-1,平均突起長度明顯縮短(P＜0.01).與溶媒對照組相比,RH 2,4和8μmol·L-1組MAP2 mRNA錶達量明顯增加(P＜0.01).結論 RH對新生大鼠皮質神經元具有神經營養作用,能促進神經元突起的生長和提高神經元的存活率.RH神經營養作用可能部分通過激活Trk受體,繼而激活Ras/PI3 K/PKB通路而髮揮的.
목적 연구대황산(RH)대대서피질신경원적영양작용,병초보탐토기상관궤제.방법 체외DMEM/F12+ 0.4％ B27배양신생대서피질신경원,응용신경원특이성희순화매(NSE)화미관상관단백2(MAP2)면역세포화학염색법감정신경원.신경원세포가입RH 2,4화8μmol·L-1작용72 h,계산신경원평균돌기장도；혹분별동시가입Trk수체길항제K252a 50 nmol· L-화PI3K억제제LY294002 10 μmol·L -1측량신경원평균돌기장도.MTT법검측세포존활,병측정배양액중유산탈경매(LDH)적함량.역전록-취합매련반응(RT-PCR)반정량검측MAP2 mRNA표체.결과 NSE급MAP2면역형광염색결과현시,절대다수세포정양성반응,소배양적세포90％이상위신경원.MTT화LDH검측결과표명,여용매대조조상비,RH2,4화8 μmol· L-1능명현제고신경원존활솔(P＜0.01)；평균돌기장도명현증가(P＜0.01).여RH8 μmol·L -1조상비,동시가입K252a 50 nmol·L-1혹LY294002 10 μmol·L-1,평균돌기장도명현축단(P＜0.01).여용매대조조상비,RH 2,4화8μmol·L-1조MAP2 mRNA표체량명현증가(P＜0.01).결론 RH대신생대서피질신경원구유신경영양작용,능촉진신경원돌기적생장화제고신경원적존활솔.RH신경영양작용가능부분통과격활Trk수체,계이격활Ras/PI3 K/PKB통로이발휘적.
