科学技术与工程
科學技術與工程
과학기술여공정
SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
2005年
17期
1252-1255
,共4页
β-secretase%真核表达%昆虫细胞%Alzheimer's病
β-secretase%真覈錶達%昆蟲細胞%Alzheimer's病
β-secretase%진핵표체%곤충세포%Alzheimer's병
为了获得有活性的重组β-secretase并研究其功能,寻找特异性抑制剂,应用RT-PCR技术,从人胚胎脑组织特异性扩增并克隆了人BACE1编码基因的胞外片断(BACE1-454).测序后与质粒pFastBac连接,得到含BACE1-454基因的重组质粒pFast-BACE1-454.将其转化到含有杆状病毒穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中进行转座重组,用琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增对重组穿梭载体Bacmid-BACE1-454进行鉴定.将Bacmid-BACE1-454经脂质体介导转染Sf9细胞,收获病毒.用重组杆状病毒颗粒感染昆虫细胞,表达蛋白,免疫印迹证实所获蛋白产品具有特异的免疫反应性.
為瞭穫得有活性的重組β-secretase併研究其功能,尋找特異性抑製劑,應用RT-PCR技術,從人胚胎腦組織特異性擴增併剋隆瞭人BACE1編碼基因的胞外片斷(BACE1-454).測序後與質粒pFastBac連接,得到含BACE1-454基因的重組質粒pFast-BACE1-454.將其轉化到含有桿狀病毒穿梭載體Bacmid的感受態細胞DH10Bac中進行轉座重組,用瓊脂糖凝膠電泳和PCR擴增對重組穿梭載體Bacmid-BACE1-454進行鑒定.將Bacmid-BACE1-454經脂質體介導轉染Sf9細胞,收穫病毒.用重組桿狀病毒顆粒感染昆蟲細胞,錶達蛋白,免疫印跡證實所穫蛋白產品具有特異的免疫反應性.
위료획득유활성적중조β-secretase병연구기공능,심조특이성억제제,응용RT-PCR기술,종인배태뇌조직특이성확증병극륭료인BACE1편마기인적포외편단(BACE1-454).측서후여질립pFastBac련접,득도함BACE1-454기인적중조질립pFast-BACE1-454.장기전화도함유간상병독천사재체Bacmid적감수태세포DH10Bac중진행전좌중조,용경지당응효전영화PCR확증대중조천사재체Bacmid-BACE1-454진행감정.장Bacmid-BACE1-454경지질체개도전염Sf9세포,수획병독.용중조간상병독과립감염곤충세포,표체단백,면역인적증실소획단백산품구유특이적면역반응성.
