西南国防医药
西南國防醫藥
서남국방의약
MEDICAL JOURNAL OF NATIONAL DEFENDING FORCES IN SOUTHWEST CHINA
2006年
2期
172-175
,共4页
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体%聚合酶链反应%凋亡抑素
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體%聚閤酶鏈反應%凋亡抑素
종류배사인자상관조망유도배체%취합매련반응%조망억소
目的:探讨凋亡抑素(survivin,SVV)启动子调控的TRAIL肿瘤细胞内特异表达在宫颈癌治疗中的应用意义.方法:提取人外周血淋巴细胞总RNA,采用RT-PCR方法,用带有IL-2信号肽基因序列的引物扩增TRAIL基因,克隆入真核表达载体pGL-Basic/surp中SVV启动子的下游,构建肿瘤特异性分泌表达TRAIL基因的真核表达载体pGL-Basic/surp/TRAIL.转染宫颈癌Hela细胞及正常人肝细胞(7702),RT-PCR鉴定转染细胞中的TRAIL表达.结果:RT-PCR扩增得到了613bp的cDNA片断,pGL-Basic/surp/TRAIL经酶切及测序鉴定与GenBank中报道的IL-2信号肽和TRAIL凋亡诱导功能区cDNA序列完全一致;转染细胞RT-PCR鉴定结果显示,Hela细胞中可扩增出600bp基因片段,而7702细胞中未见该特异性扩增条带.结论:重组真核表达载体pGL-Basic/surp/TRAIL能够高效、特异性地表达于Hela细胞中,其成功构建为特异性肿瘤基因治疗提供了可行的理想工具.
目的:探討凋亡抑素(survivin,SVV)啟動子調控的TRAIL腫瘤細胞內特異錶達在宮頸癌治療中的應用意義.方法:提取人外週血淋巴細胞總RNA,採用RT-PCR方法,用帶有IL-2信號肽基因序列的引物擴增TRAIL基因,剋隆入真覈錶達載體pGL-Basic/surp中SVV啟動子的下遊,構建腫瘤特異性分泌錶達TRAIL基因的真覈錶達載體pGL-Basic/surp/TRAIL.轉染宮頸癌Hela細胞及正常人肝細胞(7702),RT-PCR鑒定轉染細胞中的TRAIL錶達.結果:RT-PCR擴增得到瞭613bp的cDNA片斷,pGL-Basic/surp/TRAIL經酶切及測序鑒定與GenBank中報道的IL-2信號肽和TRAIL凋亡誘導功能區cDNA序列完全一緻;轉染細胞RT-PCR鑒定結果顯示,Hela細胞中可擴增齣600bp基因片段,而7702細胞中未見該特異性擴增條帶.結論:重組真覈錶達載體pGL-Basic/surp/TRAIL能夠高效、特異性地錶達于Hela細胞中,其成功構建為特異性腫瘤基因治療提供瞭可行的理想工具.
목적:탐토조망억소(survivin,SVV)계동자조공적TRAIL종류세포내특이표체재궁경암치료중적응용의의.방법:제취인외주혈림파세포총RNA,채용RT-PCR방법,용대유IL-2신호태기인서렬적인물확증TRAIL기인,극륭입진핵표체재체pGL-Basic/surp중SVV계동자적하유,구건종류특이성분비표체TRAIL기인적진핵표체재체pGL-Basic/surp/TRAIL.전염궁경암Hela세포급정상인간세포(7702),RT-PCR감정전염세포중적TRAIL표체.결과:RT-PCR확증득도료613bp적cDNA편단,pGL-Basic/surp/TRAIL경매절급측서감정여GenBank중보도적IL-2신호태화TRAIL조망유도공능구cDNA서렬완전일치;전염세포RT-PCR감정결과현시,Hela세포중가확증출600bp기인편단,이7702세포중미견해특이성확증조대.결론:중조진핵표체재체pGL-Basic/surp/TRAIL능구고효、특이성지표체우Hela세포중,기성공구건위특이성종류기인치료제공료가행적이상공구.
