CAJ | 학술논문

旨在构建由巨噬细胞特异性启动子调控的抗菌肽PR39基因腺病毒表达载体,检测目的基因在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达.PCR扩增巨噬细胞启动子/抗菌肽PR39成熟肤基因序列,插入腺病毒穿梭载体pAdTrack中,重组穿梭质料(pAdTrack-SP/PR39)与腺病毒骨架(pAdEasy-1)共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组产生重组腺病毒载体(pAd-SP/PR39).pAd-SP/PR39经Pac Ⅰ线性化后转染293细胞,包装出重组腺病毒(Ad-SP/PR39).Ad-SP/PR39感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,经RT-PCR和免疫细胞化学检测PR39的靶向表达特异性.成功构建了由巨噬细胞特异性启动子调控的抗菌肽PR39基因腺病毒表达载体.包装出的重组腺病毒仍然能感染小鼠巨噬细胞且高效表达抗菌肽PR39.构建的重组腺病毒能够在巨噬细胞中表达抗菌肤PR39基因,为靶向表达抗菌肽在胞内菌感染治疗中的应用奠定了基础.
지재구건유거서세포특이성계동자조공적항균태PR39기인선병독표체재체,검측목적기인재소서거서세포RAW264.7중적표체.PCR확증거서세포계동자/항균태PR39성숙부기인서렬,삽입선병독천사재체pAdTrack중,중조천사질료(pAdTrack-SP/PR39)여선병독골가(pAdEasy-1)공전화대장간균BJ5183,통과세균내동원중조산생중조선병독재체(pAd-SP/PR39).pAd-SP/PR39경Pac Ⅰ선성화후전염293세포,포장출중조선병독(Ad-SP/PR39).Ad-SP/PR39감염소서거서세포RAW264.7,경RT-PCR화면역세포화학검측PR39적파향표체특이성.성공구건료유거서세포특이성계동자조공적항균태PR39기인선병독표체재체.포장출적중조선병독잉연능감염소서거서세포차고효표체항균태PR39.구건적중조선병독능구재거서세포중표체항균부PR39기인,위파향표체항균태재포내균감염치료중적응용전정료기출.