医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2010年
10期
62-65
,共4页
王伟%石瑞如%张国龙%付光宇%彭义利%苑星
王偉%石瑞如%張國龍%付光宇%彭義利%苑星
왕위%석서여%장국룡%부광우%팽의리%원성
异源双链分析%基因突变%高效液相色谱法%核酸酶%分枝杆菌%结核
異源雙鏈分析%基因突變%高效液相色譜法%覈痠酶%分枝桿菌%結覈
이원쌍련분석%기인돌변%고효액상색보법%핵산매%분지간균%결핵
目的 采用变性高效液相色谱(DHPLC)和Surveyor酶法分析结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药基因gyrA突变, 探讨这两种异源双链分析法在结核菌耐药快速检测中的应用价值.方法 102株结核分枝杆菌临床分离株(常规药敏试验显示80株氧氟沙星耐药, 22株敏感), PCR扩增gyrA基因氟喹诺酮类耐药决定区域, 与参照菌株M.tb Erdman的扩增产物形成异源双链, 然后分别采用DHPLC和Surveyor酶法检测基因突变, 同时进行DNA测序作为对照.结果 DHPLC法和Surveyor酶法与DNA测序法相比, 具有同样的检出率(均为100%), 80株耐药株均存在gyrA基因突变, 而22株敏感株均无基因突变发生.结论 DHPLC法和Surveyor酶法均可用来快速检测结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药.两者均简便, 稳定, 灵敏, 前者高通量, 全自动化, 但需要昂贵的设备; 后者成本低, 不需要特殊设备, 适合我国大部分临床实验室开展.
目的 採用變性高效液相色譜(DHPLC)和Surveyor酶法分析結覈分枝桿菌氟喹諾酮類耐藥基因gyrA突變, 探討這兩種異源雙鏈分析法在結覈菌耐藥快速檢測中的應用價值.方法 102株結覈分枝桿菌臨床分離株(常規藥敏試驗顯示80株氧氟沙星耐藥, 22株敏感), PCR擴增gyrA基因氟喹諾酮類耐藥決定區域, 與參照菌株M.tb Erdman的擴增產物形成異源雙鏈, 然後分彆採用DHPLC和Surveyor酶法檢測基因突變, 同時進行DNA測序作為對照.結果 DHPLC法和Surveyor酶法與DNA測序法相比, 具有同樣的檢齣率(均為100%), 80株耐藥株均存在gyrA基因突變, 而22株敏感株均無基因突變髮生.結論 DHPLC法和Surveyor酶法均可用來快速檢測結覈分枝桿菌氟喹諾酮類耐藥.兩者均簡便, 穩定, 靈敏, 前者高通量, 全自動化, 但需要昂貴的設備; 後者成本低, 不需要特殊設備, 適閤我國大部分臨床實驗室開展.
목적 채용변성고효액상색보(DHPLC)화Surveyor매법분석결핵분지간균불규낙동류내약기인gyrA돌변, 탐토저량충이원쌍련분석법재결핵균내약쾌속검측중적응용개치.방법 102주결핵분지간균림상분리주(상규약민시험현시80주양불사성내약, 22주민감), PCR확증gyrA기인불규낙동류내약결정구역, 여삼조균주M.tb Erdman적확증산물형성이원쌍련, 연후분별채용DHPLC화Surveyor매법검측기인돌변, 동시진행DNA측서작위대조.결과 DHPLC법화Surveyor매법여DNA측서법상비, 구유동양적검출솔(균위100%), 80주내약주균존재gyrA기인돌변, 이22주민감주균무기인돌변발생.결론 DHPLC법화Surveyor매법균가용래쾌속검측결핵분지간균불규낙동류내약.량자균간편, 은정, 령민, 전자고통량, 전자동화, 단수요앙귀적설비; 후자성본저, 불수요특수설비, 괄합아국대부분림상실험실개전.
