中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2010年
9期
795-798,804
,共5页
GM-CSF%CFP10%卡介苗%穿梭质粒
GM-CSF%CFP10%卡介苗%穿梭質粒
GM-CSF%CFP10%잡개묘%천사질립
目的 构建能共同表达人粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和结核分枝杆菌培养滤液蛋白10(CFP10)的重组卡介苗(recombinant BCG, rBCG).方法 运用分子克隆技术,通过SOE法(重叠延伸,Gene splicing by overlap extension),扩增GMCSF-CFP10嵌合基因,将该基因定向克隆到穿梭表达质粒pMV361中,构建重组pMV GMCSF-CFP10质粒.用电穿孔法将重组质粒导入BCG菌构建rBCG,经热诱导后对rBCG表达产物作SDS-PAGE及免疫印迹分析.结果 重组质粒pMVGMCSF-CFP10经PCR、酶切及测序证实构建成功,并在BCG中经热诱导成功表达了具有GMCSF-CFP10的嵌合蛋白.结论 成功构建能表达GMCSF-CFP10蛋白的重组BCG,为发展新型结核病疫苗奠定基础.
目的 構建能共同錶達人粒-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)和結覈分枝桿菌培養濾液蛋白10(CFP10)的重組卡介苗(recombinant BCG, rBCG).方法 運用分子剋隆技術,通過SOE法(重疊延伸,Gene splicing by overlap extension),擴增GMCSF-CFP10嵌閤基因,將該基因定嚮剋隆到穿梭錶達質粒pMV361中,構建重組pMV GMCSF-CFP10質粒.用電穿孔法將重組質粒導入BCG菌構建rBCG,經熱誘導後對rBCG錶達產物作SDS-PAGE及免疫印跡分析.結果 重組質粒pMVGMCSF-CFP10經PCR、酶切及測序證實構建成功,併在BCG中經熱誘導成功錶達瞭具有GMCSF-CFP10的嵌閤蛋白.結論 成功構建能錶達GMCSF-CFP10蛋白的重組BCG,為髮展新型結覈病疫苗奠定基礎.
목적 구건능공동표체인립-거서세포집락자격인자(GM-CSF)화결핵분지간균배양려액단백10(CFP10)적중조잡개묘(recombinant BCG, rBCG).방법 운용분자극륭기술,통과SOE법(중첩연신,Gene splicing by overlap extension),확증GMCSF-CFP10감합기인,장해기인정향극륭도천사표체질립pMV361중,구건중조pMV GMCSF-CFP10질립.용전천공법장중조질립도입BCG균구건rBCG,경열유도후대rBCG표체산물작SDS-PAGE급면역인적분석.결과 중조질립pMVGMCSF-CFP10경PCR、매절급측서증실구건성공,병재BCG중경열유도성공표체료구유GMCSF-CFP10적감합단백.결론 성공구건능표체GMCSF-CFP10단백적중조BCG,위발전신형결핵병역묘전정기출.
