CAJ | 학술논문

背景:目前大鼠神经干细胞体外诱导分化的研究报道诸多,但其分化过程很难控制,很多实验的操作方法复杂,分化比率也很低.目的:探索大鼠胚胎前脑神经干细胞体外原代及传代培养方法,并观察其分化规律.方法:胎鼠在无菌条件下分离出前脑,制备单细胞悬液,以1×1011L-1接种于含N2的DMEM/F12培养基中培养,传代培养过程中加入BrdU,标记神经干细胞球.诱导分化实验分为多聚赖氨酸铺板组、明胶铺板组和无铺板组.采用体积分数20%胎牛血清刺激其分化.免疫细胞化学检测nestin、BrdU及在血清诱导条件下神经干细胞向神经细胞分化的能力.结果与结论:细胞呈神经干细胞样生长,具有连续增殖能力,可以传代培养.传代神经球中的细胞均呈nestin阳性和BrdU阳性.多聚赖氨酸铺板组和明胶铺板组贴壁后分化为神经细胞能力强于无铺板组(P < 0.01).多聚赖氨酸铺板组略强于明胶铺板组(P > 0.05).神经谱系标记物神经胶质纤维酸性蛋白和微管相关蛋白2的免疫细胞化学结果均阳性.结果表明,大鼠胚胎前脑富含神经干细胞,其分化观察,多聚赖氨酸和明胶在诱导神经干细胞分化中作为细胞贴壁支持物提高分化细胞数量的作用,且多分化为星形胶质细胞.
배경:목전대서신경간세포체외유도분화적연구보도제다,단기분화과정흔난공제,흔다실험적조작방법복잡,분화비솔야흔저.목적:탐색대서배태전뇌신경간세포체외원대급전대배양방법,병관찰기분화규률.방법:태서재무균조건하분리출전뇌,제비단세포현액,이1×1011L-1접충우함N2적DMEM/F12배양기중배양,전대배양과정중가입BrdU,표기신경간세포구.유도분화실험분위다취뢰안산포판조、명효포판조화무포판조.채용체적분수20%태우혈청자격기분화.면역세포화학검측nestin、BrdU급재혈청유도조건하신경간세포향신경세포분화적능력.결과여결론:세포정신경간세포양생장,구유련속증식능력,가이전대배양.전대신경구중적세포균정nestin양성화BrdU양성.다취뢰안산포판조화명효포판조첩벽후분화위신경세포능력강우무포판조(P < 0.01).다취뢰안산포판조략강우명효포판조(P > 0.05).신경보계표기물신경효질섬유산성단백화미관상관단백2적면역세포화학결과균양성.결과표명,대서배태전뇌부함신경간세포,기분화관찰,다취뢰안산화명효재유도신경간세포분화중작위세포첩벽지지물제고분화세포수량적작용,차다분화위성형효질세포.