生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2011年
4期
22-26
,共5页
姜茵%奚悦%王小平%何殿殿%李妍
薑茵%奚悅%王小平%何殿殿%李妍
강인%해열%왕소평%하전전%리연
幽门螺杆菌%Lpp20%融合表达%GST标签切除%纯化
幽門螺桿菌%Lpp20%融閤錶達%GST標籤切除%純化
유문라간균%Lpp20%융합표체%GST표첨절제%순화
目的:利用GST融合基因表达系统表达Lpp20-GST融合蛋白,并利用凝血酶切除GST标签.方法:IPTG诱导重组质粒Lpp20/pGEX-4T -1在大肠杆菌BL21 (DE3)中表达,菌体经反复冻融、溶菌酶裂解及超声破菌后,发现Lpp20-GST融合蛋白以部分可溶性的形式表达.采用GST蛋白纯化系统对其纯化,得到Lpp20- GST融合蛋白,再用凝血酶进行GST标签的切除,所得产物进行Western Blot鉴定.结果:高效表达出Lpp20-GST融合蛋白的相对分子质量约4.5kDa,凝血酶成功切除了GST标签,Western Blot证实Lpp20蛋白能被鼠抗Lpp20单克隆抗体识别.结论:成功表达和纯化了重组Lpp20蛋白,为深入研究Lpp20的功能奠定了基础.
目的:利用GST融閤基因錶達繫統錶達Lpp20-GST融閤蛋白,併利用凝血酶切除GST標籤.方法:IPTG誘導重組質粒Lpp20/pGEX-4T -1在大腸桿菌BL21 (DE3)中錶達,菌體經反複凍融、溶菌酶裂解及超聲破菌後,髮現Lpp20-GST融閤蛋白以部分可溶性的形式錶達.採用GST蛋白純化繫統對其純化,得到Lpp20- GST融閤蛋白,再用凝血酶進行GST標籤的切除,所得產物進行Western Blot鑒定.結果:高效錶達齣Lpp20-GST融閤蛋白的相對分子質量約4.5kDa,凝血酶成功切除瞭GST標籤,Western Blot證實Lpp20蛋白能被鼠抗Lpp20單剋隆抗體識彆.結論:成功錶達和純化瞭重組Lpp20蛋白,為深入研究Lpp20的功能奠定瞭基礎.
목적:이용GST융합기인표체계통표체Lpp20-GST융합단백,병이용응혈매절제GST표첨.방법:IPTG유도중조질립Lpp20/pGEX-4T -1재대장간균BL21 (DE3)중표체,균체경반복동융、용균매렬해급초성파균후,발현Lpp20-GST융합단백이부분가용성적형식표체.채용GST단백순화계통대기순화,득도Lpp20- GST융합단백,재용응혈매진행GST표첨적절제,소득산물진행Western Blot감정.결과:고효표체출Lpp20-GST융합단백적상대분자질량약4.5kDa,응혈매성공절제료GST표첨,Western Blot증실Lpp20단백능피서항Lpp20단극륭항체식별.결론:성공표체화순화료중조Lpp20단백,위심입연구Lpp20적공능전정료기출.
