中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2011年
3期
1-8
,共8页
刘欢欢%周艳君%姜一峰%张善瑞%童光志
劉歡歡%週豔君%薑一峰%張善瑞%童光誌
류환환%주염군%강일봉%장선서%동광지
猪繁殖与呼吸系统综合征病毒%GP3蛋白%糖基化位点%定点突变
豬繁殖與呼吸繫統綜閤徵病毒%GP3蛋白%糖基化位點%定點突變
저번식여호흡계통종합정병독%GP3단백%당기화위점%정점돌변
为研究猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP3蛋白糖基化位点的作用,在弱毒疫苗株HuN4-F112感染性克隆的基础上,采用点突变的方法对GP3蛋白N29、N42、N50、N131位进行单点或多点组合突变去糖基化,构建了不同糖基化位点的单点和多点突变的PRRSV全长cDNA克隆,最终成功救获N29Q、N42Q、N50Q、N131Q、N29Q/N50Q、N29Q/N195Q六株含糖基化位点突变的病毒,而其余几种糖基化位点突变组合的全长cDNA未能拯救出病毒.对拯救毒株进行滴度测定及多步生长曲线绘制等特性分析,结果显示N29Q、N42Q、N50Q、N131Q位单个糖基化位点的缺失虽不影响子代病毒的产生但会不同程度地降低PRRSV感染细胞的能力,其中N50Q突变体较亲本下降6个滴度且生长明显延迟.多个糖基化位点同时缺失则会影响病毒的拯救,推测这些糖基化位点可能是产生具有感染性病毒粒子所不可或缺的.
為研究豬繁殖與呼吸繫統綜閤徵病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP3蛋白糖基化位點的作用,在弱毒疫苗株HuN4-F112感染性剋隆的基礎上,採用點突變的方法對GP3蛋白N29、N42、N50、N131位進行單點或多點組閤突變去糖基化,構建瞭不同糖基化位點的單點和多點突變的PRRSV全長cDNA剋隆,最終成功救穫N29Q、N42Q、N50Q、N131Q、N29Q/N50Q、N29Q/N195Q六株含糖基化位點突變的病毒,而其餘幾種糖基化位點突變組閤的全長cDNA未能拯救齣病毒.對拯救毒株進行滴度測定及多步生長麯線繪製等特性分析,結果顯示N29Q、N42Q、N50Q、N131Q位單箇糖基化位點的缺失雖不影響子代病毒的產生但會不同程度地降低PRRSV感染細胞的能力,其中N50Q突變體較親本下降6箇滴度且生長明顯延遲.多箇糖基化位點同時缺失則會影響病毒的拯救,推測這些糖基化位點可能是產生具有感染性病毒粒子所不可或缺的.
위연구저번식여호흡계통종합정병독(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP3단백당기화위점적작용,재약독역묘주HuN4-F112감염성극륭적기출상,채용점돌변적방법대GP3단백N29、N42、N50、N131위진행단점혹다점조합돌변거당기화,구건료불동당기화위점적단점화다점돌변적PRRSV전장cDNA극륭,최종성공구획N29Q、N42Q、N50Q、N131Q、N29Q/N50Q、N29Q/N195Q륙주함당기화위점돌변적병독,이기여궤충당기화위점돌변조합적전장cDNA미능증구출병독.대증구독주진행적도측정급다보생장곡선회제등특성분석,결과현시N29Q、N42Q、N50Q、N131Q위단개당기화위점적결실수불영향자대병독적산생단회불동정도지강저PRRSV감염세포적능력,기중N50Q돌변체교친본하강6개적도차생장명현연지.다개당기화위점동시결실칙회영향병독적증구,추측저사당기화위점가능시산생구유감염성병독입자소불가혹결적.
