中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2012年
10期
890-893
,共4页
谭岩%刘磊%方艳秋%蒋永兴
譚巖%劉磊%方豔鞦%蔣永興
담암%류뢰%방염추%장영흥
重组TRAIL蛋白%凋亡抑制基因FLIP%A549细胞株%非小细胞肺癌
重組TRAIL蛋白%凋亡抑製基因FLIP%A549細胞株%非小細胞肺癌
중조TRAIL단백%조망억제기인FLIP%A549세포주%비소세포폐암
目的:探讨抑制c-FLIPL表达增强rhTRAIL蛋白杀伤肺癌A549细胞株的可行性.方法:构建c-FLIPL序列特异性siRNAs表达载体并转染A549细胞抑制c-FLIPL基因表达,化学抑制剂他莫昔芬抑制c-FLIPL蛋白表达.RT-PCR和Western blot法检测c-FLIPL 的mRNA和蛋白表达的变化.Western blot法检测caspase-8的活化情况.流式细胞仪检测A549细胞凋亡率,MTT法检测联合应用RNAi+rhTRAIL和他莫昔芬+rhTRAIL对A549细胞的杀伤活性.结果:特异性siRNA片段能显著降低A549细胞中c-FLIPL的mRNA水平和蛋白水平.他莫昔芬可以显著抑制c-FLIPL蛋白的表达.两者均可以实现caspase-8的活化,并促进rhTRAIL对A549细胞诱导凋亡作用,凋亡率从2.52%提高到64.5%和59.2%(P<0.05),他莫昔芬和siRNA均可显著促进rhTRAIL蛋白对A549细胞的增殖抑制作用,抑制率分别提高到73.2%和69.5%(P<0.05).结论:靶向抑制FLIP蛋白表达能增加A549细胞对rhTRAIL诱导细胞凋亡的敏感性,有利于促进rhTRAIL蛋白在治疗NSCLC方面的研究应用.
目的:探討抑製c-FLIPL錶達增彊rhTRAIL蛋白殺傷肺癌A549細胞株的可行性.方法:構建c-FLIPL序列特異性siRNAs錶達載體併轉染A549細胞抑製c-FLIPL基因錶達,化學抑製劑他莫昔芬抑製c-FLIPL蛋白錶達.RT-PCR和Western blot法檢測c-FLIPL 的mRNA和蛋白錶達的變化.Western blot法檢測caspase-8的活化情況.流式細胞儀檢測A549細胞凋亡率,MTT法檢測聯閤應用RNAi+rhTRAIL和他莫昔芬+rhTRAIL對A549細胞的殺傷活性.結果:特異性siRNA片段能顯著降低A549細胞中c-FLIPL的mRNA水平和蛋白水平.他莫昔芬可以顯著抑製c-FLIPL蛋白的錶達.兩者均可以實現caspase-8的活化,併促進rhTRAIL對A549細胞誘導凋亡作用,凋亡率從2.52%提高到64.5%和59.2%(P<0.05),他莫昔芬和siRNA均可顯著促進rhTRAIL蛋白對A549細胞的增殖抑製作用,抑製率分彆提高到73.2%和69.5%(P<0.05).結論:靶嚮抑製FLIP蛋白錶達能增加A549細胞對rhTRAIL誘導細胞凋亡的敏感性,有利于促進rhTRAIL蛋白在治療NSCLC方麵的研究應用.
목적:탐토억제c-FLIPL표체증강rhTRAIL단백살상폐암A549세포주적가행성.방법:구건c-FLIPL서렬특이성siRNAs표체재체병전염A549세포억제c-FLIPL기인표체,화학억제제타막석분억제c-FLIPL단백표체.RT-PCR화Western blot법검측c-FLIPL 적mRNA화단백표체적변화.Western blot법검측caspase-8적활화정황.류식세포의검측A549세포조망솔,MTT법검측연합응용RNAi+rhTRAIL화타막석분+rhTRAIL대A549세포적살상활성.결과:특이성siRNA편단능현저강저A549세포중c-FLIPL적mRNA수평화단백수평.타막석분가이현저억제c-FLIPL단백적표체.량자균가이실현caspase-8적활화,병촉진rhTRAIL대A549세포유도조망작용,조망솔종2.52%제고도64.5%화59.2%(P<0.05),타막석분화siRNA균가현저촉진rhTRAIL단백대A549세포적증식억제작용,억제솔분별제고도73.2%화69.5%(P<0.05).결론:파향억제FLIP단백표체능증가A549세포대rhTRAIL유도세포조망적민감성,유리우촉진rhTRAIL단백재치료NSCLC방면적연구응용.
