徐州医学院学报
徐州醫學院學報
서주의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU
2005年
6期
514-518
,共5页
李望%孙晓青%张成静%胡书群%裴东生
李望%孫曉青%張成靜%鬍書群%裴東生
리망%손효청%장성정%호서군%배동생
FasL%基因克隆%序列分析%慢病毒载体
FasL%基因剋隆%序列分析%慢病毒載體
FasL%기인극륭%서렬분석%만병독재체
目的克隆大鼠FasL基因全长序列,构建其用于真核细胞表达的重组慢病毒载体pLO134-FasL,为进一步研究FasL蛋白生物学功能奠定基础.方法根据大鼠FasL cDNA序列设计合成上、下游引物,以大鼠脾细胞提取的总RNA为模板,行RT-PCR扩增.扩增片断经限制性内切酶BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后,插入慢病毒载体pLO134中并转化感受态细胞JM101.扩增后酶切鉴定,对正确的阳性克隆行DNA全序列分析.结果 RT-PCR扩增获得870 bp DNA片段,DNA序列分析结果与发表于GenBank上的序列(U03470)完全一致.结论成功克隆大鼠FasL基因并构建其用于真核细胞表达的重组慢病毒载体pLO134-FasL.
目的剋隆大鼠FasL基因全長序列,構建其用于真覈細胞錶達的重組慢病毒載體pLO134-FasL,為進一步研究FasL蛋白生物學功能奠定基礎.方法根據大鼠FasL cDNA序列設計閤成上、下遊引物,以大鼠脾細胞提取的總RNA為模闆,行RT-PCR擴增.擴增片斷經限製性內切酶BamHⅠ和EcoRⅠ雙酶切後,插入慢病毒載體pLO134中併轉化感受態細胞JM101.擴增後酶切鑒定,對正確的暘性剋隆行DNA全序列分析.結果 RT-PCR擴增穫得870 bp DNA片段,DNA序列分析結果與髮錶于GenBank上的序列(U03470)完全一緻.結論成功剋隆大鼠FasL基因併構建其用于真覈細胞錶達的重組慢病毒載體pLO134-FasL.
목적극륭대서FasL기인전장서렬,구건기용우진핵세포표체적중조만병독재체pLO134-FasL,위진일보연구FasL단백생물학공능전정기출.방법근거대서FasL cDNA서렬설계합성상、하유인물,이대서비세포제취적총RNA위모판,행RT-PCR확증.확증편단경한제성내절매BamHⅠ화EcoRⅠ쌍매절후,삽입만병독재체pLO134중병전화감수태세포JM101.확증후매절감정,대정학적양성극륭행DNA전서렬분석.결과 RT-PCR확증획득870 bp DNA편단,DNA서렬분석결과여발표우GenBank상적서렬(U03470)완전일치.결론성공극륭대서FasL기인병구건기용우진핵세포표체적중조만병독재체pLO134-FasL.
