人类新基因flj20174的克隆、亚细胞定位、表达谱及功能初探
인류신기인flj20174적극륭、아세포정위、표체보급공능초탐
Cloning, subcellular location,expression pattern of a new human gene flj20174 and its function pilot study
  • 万方数据
    军事医学科学院院刊 군사의학과학원원간
    BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
    2006年 5期 410-414 ,共5页

    刘朝晖%曹国军%陈留存%杨光%李少华%高亚萍%丁红梅%范明%沈倍奋%邵宁生

    류조휘%조국군%진류존%양광%리소화%고아평%정홍매%범명%침배강%소저생

    flj20174%基因表达%亚细胞定位%细胞凋亡 flj20174%基因錶達%亞細胞定位%細胞凋亡
    flj20174%기인표체%아세포정위%세포조망
    目的: 研究人类系统性RNAi相关基因flj20174的克隆表达、亚细胞定位和表达谱,以及功能的初步探索.方法:利用生物信息学方法分析、预测flj20174基因的表达谱和功能;采用RT-PCR技术,从健康人外周血单个核细胞cDNA中,扩增获得flj20174可能的全长编码区,并将其亚克隆于pEGFP-N1载体;利用Northern杂交鉴定其转录本;利用半定量PCR确定flj20174在免疫组织和免疫细胞中的表达谱;通过脂质体转染入HeLa细胞,观察融合蛋白的亚细胞定位和过表达对细胞状态的影响.结果与结论:获得了2 484 bp的全长编码区,测序后发现与NCBI公布的Ak00018的序列完全一致;Northern杂交证实其转录本约为4 669 bp;证实该基因属于低丰度基因,在免疫细胞中有相对较高的表达,并在B细胞和T细胞激活后表达量下降;与EGFP融合表达后可见该蛋白主要分布于内膜系统,而且过表达该融合蛋白可以引起细胞的死亡,推测此过程可能与机体的免疫防御相关.
    목적: 연구인류계통성RNAi상관기인flj20174적극륭표체、아세포정위화표체보,이급공능적초보탐색.방법:이용생물신식학방법분석、예측flj20174기인적표체보화공능;채용RT-PCR기술,종건강인외주혈단개핵세포cDNA중,확증획득flj20174가능적전장편마구,병장기아극륭우pEGFP-N1재체;이용Northern잡교감정기전록본;이용반정량PCR학정flj20174재면역조직화면역세포중적표체보;통과지질체전염입HeLa세포,관찰융합단백적아세포정위화과표체대세포상태적영향.결과여결론:획득료2 484 bp적전장편마구,측서후발현여NCBI공포적Ak00018적서렬완전일치;Northern잡교증실기전록본약위4 669 bp;증실해기인속우저봉도기인,재면역세포중유상대교고적표체,병재B세포화T세포격활후표체량하강;여EGFP융합표체후가견해단백주요분포우내막계통,이차과표체해융합단백가이인기세포적사망,추측차과정가능여궤체적면역방어상관.
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