食品与发酵工业
食品與髮酵工業
식품여발효공업
FOOD AND FERMENTATION INDUSTRIES
2007年
3期
12-14
,共3页
甘油脱水酶基因(gldABC)%1,3-丙二醇氧化还原酶基因(dhaT)%共表达
甘油脫水酶基因(gldABC)%1,3-丙二醇氧化還原酶基因(dhaT)%共錶達
감유탈수매기인(gldABC)%1,3-병이순양화환원매기인(dhaT)%공표체
将dhaT基因片段以顺反子的形式插入到重组质粒pMD19TS2中gldABC基因的下游,形成重组克隆质粒pMD19TS3,进而将gldABC与dhaT基因以多顺反子的形式亚克隆至pET-28a(+)表达载体上.终浓度为1mmol/L IPTG诱导重组大肠杆菌E.coli/pET-28a(+)/gldABC-dhaT 2h,SDS-PAGE电泳分析结果表明分别在甘油脱水酶三个亚基分子量相对应的61ku、21ku、16ku和1,3-丙二醇氧化还原酶亚基分子量相对应的42 ku的位置上出现了特异性条带.上清液中酶活性分别为甘油脱水酶23.7U/mL,1,3-丙二醇氧化还原酶30.4 U/mL.
將dhaT基因片段以順反子的形式插入到重組質粒pMD19TS2中gldABC基因的下遊,形成重組剋隆質粒pMD19TS3,進而將gldABC與dhaT基因以多順反子的形式亞剋隆至pET-28a(+)錶達載體上.終濃度為1mmol/L IPTG誘導重組大腸桿菌E.coli/pET-28a(+)/gldABC-dhaT 2h,SDS-PAGE電泳分析結果錶明分彆在甘油脫水酶三箇亞基分子量相對應的61ku、21ku、16ku和1,3-丙二醇氧化還原酶亞基分子量相對應的42 ku的位置上齣現瞭特異性條帶.上清液中酶活性分彆為甘油脫水酶23.7U/mL,1,3-丙二醇氧化還原酶30.4 U/mL.
장dhaT기인편단이순반자적형식삽입도중조질립pMD19TS2중gldABC기인적하유,형성중조극륭질립pMD19TS3,진이장gldABC여dhaT기인이다순반자적형식아극륭지pET-28a(+)표체재체상.종농도위1mmol/L IPTG유도중조대장간균E.coli/pET-28a(+)/gldABC-dhaT 2h,SDS-PAGE전영분석결과표명분별재감유탈수매삼개아기분자량상대응적61ku、21ku、16ku화1,3-병이순양화환원매아기분자량상대응적42 ku적위치상출현료특이성조대.상청액중매활성분별위감유탈수매23.7U/mL,1,3-병이순양화환원매30.4 U/mL.
