南京医科大学学报(自然科学版)
南京醫科大學學報(自然科學版)
남경의과대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NANJING MEDICAL UNIVERSITY
2007年
6期
527-529,533,封二
,共5页
沙玉根%黄松明%张爱华%赵非%陈荣华
沙玉根%黃鬆明%張愛華%趙非%陳榮華
사옥근%황송명%장애화%조비%진영화
podocin%表达载体%CD2AP
podocin%錶達載體%CD2AP
podocin%표체재체%CD2AP
目的:构建podocin荧光表达载体,并观察其转染HEK293后对CD2AP细胞内分布的影响.方法:PCR扩增NPHS2eDNA全长,通过T/A克隆连接至pGEMT-easy载体,应用Xho Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后,再将NPHS2全长亚克隆人pEGFP-C2.将构建好的荧光表达载体pEGFP-NPHS2转染HEK293细胞,通过免疫荧光的方法观察转染前后CD2AP细胞内的分布情况.结果:①成功构建pEGFP-NPHS2荧光表达载体;②Podocin表达载体转染HEK293细胞后,CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布.结论:Podocin转染HEK293细胞可使CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布.
目的:構建podocin熒光錶達載體,併觀察其轉染HEK293後對CD2AP細胞內分佈的影響.方法:PCR擴增NPHS2eDNA全長,通過T/A剋隆連接至pGEMT-easy載體,應用Xho Ⅰ和BamH Ⅰ雙酶切後,再將NPHS2全長亞剋隆人pEGFP-C2.將構建好的熒光錶達載體pEGFP-NPHS2轉染HEK293細胞,通過免疫熒光的方法觀察轉染前後CD2AP細胞內的分佈情況.結果:①成功構建pEGFP-NPHS2熒光錶達載體;②Podocin錶達載體轉染HEK293細胞後,CD2AP由覈週轉為瀰散的細胞質分佈.結論:Podocin轉染HEK293細胞可使CD2AP由覈週轉為瀰散的細胞質分佈.
목적:구건podocin형광표체재체,병관찰기전염HEK293후대CD2AP세포내분포적영향.방법:PCR확증NPHS2eDNA전장,통과T/A극륭련접지pGEMT-easy재체,응용Xho Ⅰ화BamH Ⅰ쌍매절후,재장NPHS2전장아극륭인pEGFP-C2.장구건호적형광표체재체pEGFP-NPHS2전염HEK293세포,통과면역형광적방법관찰전염전후CD2AP세포내적분포정황.결과:①성공구건pEGFP-NPHS2형광표체재체;②Podocin표체재체전염HEK293세포후,CD2AP유핵주전위미산적세포질분포.결론:Podocin전염HEK293세포가사CD2AP유핵주전위미산적세포질분포.
