微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2007年
5期
779-784
,共6页
杨洪江%李明春%魏东盛%邢来君
楊洪江%李明春%魏東盛%邢來君
양홍강%리명춘%위동성%형래군
Ⅲ型分泌系统%pcr2基因%细菌双杂交系统%铜绿假单胞菌
Ⅲ型分泌繫統%pcr2基因%細菌雙雜交繫統%銅綠假單胞菌
Ⅲ형분비계통%pcr2기인%세균쌍잡교계통%동록가단포균
Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,TTSS)是铜绿假单胞菌的重要致病因子,pcr2基因位于TTSS基因簇中popN操纵子的第三位,有关该基因的具体功能研究还是空白.首先,本研究采用定点诱变方法构建pcr2-突变体,发现TTSS表达和分泌ExoS和ExoT蛋白的能力显著下降,在HeLa细胞感染实验中,ExoS和ExoT蛋白注入细胞的数量明显低于野生型菌株.其次,我们采用细菌双杂交系统研究了Pcr2蛋白与其它蛋白结合的可能性,发现Pcr2蛋白与PscB蛋白一起能够结合PopN蛋白,同时Western blot实验发现Pcr2蛋白能够调控PopN蛋白的分泌.最后,实验发现Pcr2蛋白本身也能够分泌到细胞外,可能与TTSS分泌器的早期形成过程有关.
Ⅲ型分泌繫統(type Ⅲ secretion system,TTSS)是銅綠假單胞菌的重要緻病因子,pcr2基因位于TTSS基因簇中popN操縱子的第三位,有關該基因的具體功能研究還是空白.首先,本研究採用定點誘變方法構建pcr2-突變體,髮現TTSS錶達和分泌ExoS和ExoT蛋白的能力顯著下降,在HeLa細胞感染實驗中,ExoS和ExoT蛋白註入細胞的數量明顯低于野生型菌株.其次,我們採用細菌雙雜交繫統研究瞭Pcr2蛋白與其它蛋白結閤的可能性,髮現Pcr2蛋白與PscB蛋白一起能夠結閤PopN蛋白,同時Western blot實驗髮現Pcr2蛋白能夠調控PopN蛋白的分泌.最後,實驗髮現Pcr2蛋白本身也能夠分泌到細胞外,可能與TTSS分泌器的早期形成過程有關.
Ⅲ형분비계통(type Ⅲ secretion system,TTSS)시동록가단포균적중요치병인자,pcr2기인위우TTSS기인족중popN조종자적제삼위,유관해기인적구체공능연구환시공백.수선,본연구채용정점유변방법구건pcr2-돌변체,발현TTSS표체화분비ExoS화ExoT단백적능력현저하강,재HeLa세포감염실험중,ExoS화ExoT단백주입세포적수량명현저우야생형균주.기차,아문채용세균쌍잡교계통연구료Pcr2단백여기타단백결합적가능성,발현Pcr2단백여PscB단백일기능구결합PopN단백,동시Western blot실험발현Pcr2단백능구조공PopN단백적분비.최후,실험발현Pcr2단백본신야능구분비도세포외,가능여TTSS분비기적조기형성과정유관.
