安徽农学通报
安徽農學通報
안휘농학통보
AUHUI AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2008年
5期
21-24
,共4页
鸡新城疫病毒F基因%鸡源性白细胞介素18%甲病毒载体%核酸疫苗
鷄新城疫病毒F基因%鷄源性白細胞介素18%甲病毒載體%覈痠疫苗
계신성역병독F기인%계원성백세포개소18%갑병독재체%핵산역묘
根据GeneBank公布的鸡新城疫病毒(NDV)Lasota株F基因和鸡源性白细胞介素18(ChIL-18)基因序列分别设计特异性引物,且在鸡NDV F基因引物上游引入BamH Ⅰ位点、下游引入Sal Ⅰ位点,在Ch IL-18基因引物上游引入Sal Ⅰ位点、下游引入Hind Ⅲ、BamH Ⅰ位点.以鸡新城疫病毒Lasota株RNA为模板RT-PCR扩增其F基因,将F基因插入pMD18-T的BamH Ⅰ与Sal Ⅰ位点中.同时扩增上游带有Sal Ⅰ位点、下游带有Hind Ⅲ、BamH Ⅰ位点的ChIL-18基因,并将其插入到含有F基因的pMD18-T质粒的Sal Ⅰ、Hind Ⅲ位点之间,从而使NDV F基因与ChIL-18基因形成具有一个完整阅读框的融合基因,然后将融合基因片段定向克隆到pSFV单一启动子(CMV)下游,构建成F-ChIL-18融合基因重组"自杀性"质粒pSFV-F-ChIL-18.
根據GeneBank公佈的鷄新城疫病毒(NDV)Lasota株F基因和鷄源性白細胞介素18(ChIL-18)基因序列分彆設計特異性引物,且在鷄NDV F基因引物上遊引入BamH Ⅰ位點、下遊引入Sal Ⅰ位點,在Ch IL-18基因引物上遊引入Sal Ⅰ位點、下遊引入Hind Ⅲ、BamH Ⅰ位點.以鷄新城疫病毒Lasota株RNA為模闆RT-PCR擴增其F基因,將F基因插入pMD18-T的BamH Ⅰ與Sal Ⅰ位點中.同時擴增上遊帶有Sal Ⅰ位點、下遊帶有Hind Ⅲ、BamH Ⅰ位點的ChIL-18基因,併將其插入到含有F基因的pMD18-T質粒的Sal Ⅰ、Hind Ⅲ位點之間,從而使NDV F基因與ChIL-18基因形成具有一箇完整閱讀框的融閤基因,然後將融閤基因片段定嚮剋隆到pSFV單一啟動子(CMV)下遊,構建成F-ChIL-18融閤基因重組"自殺性"質粒pSFV-F-ChIL-18.
근거GeneBank공포적계신성역병독(NDV)Lasota주F기인화계원성백세포개소18(ChIL-18)기인서렬분별설계특이성인물,차재계NDV F기인인물상유인입BamH Ⅰ위점、하유인입Sal Ⅰ위점,재Ch IL-18기인인물상유인입Sal Ⅰ위점、하유인입Hind Ⅲ、BamH Ⅰ위점.이계신성역병독Lasota주RNA위모판RT-PCR확증기F기인,장F기인삽입pMD18-T적BamH Ⅰ여Sal Ⅰ위점중.동시확증상유대유Sal Ⅰ위점、하유대유Hind Ⅲ、BamH Ⅰ위점적ChIL-18기인,병장기삽입도함유F기인적pMD18-T질립적Sal Ⅰ、Hind Ⅲ위점지간,종이사NDV F기인여ChIL-18기인형성구유일개완정열독광적융합기인,연후장융합기인편단정향극륭도pSFV단일계동자(CMV)하유,구건성F-ChIL-18융합기인중조"자살성"질립pSFV-F-ChIL-18.
