CAJ | 학술논문

目的:探讨从人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中获得足够数量和高细胞毒活性的CD3-CD56+NK细胞的方法,并观察其对肝癌细胞HepG2杀伤效应.方法:以干细胞培养基(SCGM)为基础培养基,在不同浓度的抗CD3单抗、IL-2和PHA的培养条件下,从健康人PBMC中高效扩增获得CD3-CD56+NK细胞;以不同剂量的HSP70-TKD诱导NK细胞的活性,MTT法测定HSP70-TKD诱导的NK细胞对HepG2和榄香烯处理的HepGZ细胞的杀伤活性.结果:建立了从人PBMC体外扩增CD3-CD56+NK细胞体系:以SCGM为基础培养基,在600 U/mL IL-2、500 μg/L抗CD3单抗和50 mg/L PHA联合作用下,培养14 d细胞扩增了116倍,舍有(66.97±8.76)%CD3-CD56+NK细胞;HSP70-TKD诱导的NK细胞对HepG2杀伤活性低.与未经TKD诱导的NK细胞之间差异无统计学意义,P=0.298;而对税香烯处理过的HepG2杀伤活性高,诱导组与未诱导组之间差异有统计学意义,P=0.008;当TKD浓度为2.0 mg/L时,杀伤活性最高为(58.8±3.4)%.结论:以干细胞生长培养基为基础培养基,在抗CD3单抗和IL-2协同刺激下体外大量扩增NK细胞,HSP70-TKD诱导的NK细胞对细胞膜HSP70阳性的肿瘤细胞杀伤活性高,而对于细胞膜HSP70低表达的肿瘤细胞杀伤活性低.
목적:탐토종인외주혈단개핵세포(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)중획득족구수량화고세포독활성적CD3-CD56+NK세포적방법,병관찰기대간암세포HepG2살상효응.방법:이간세포배양기(SCGM)위기출배양기,재불동농도적항CD3단항、IL-2화PHA적배양조건하,종건강인PBMC중고효확증획득CD3-CD56+NK세포;이불동제량적HSP70-TKD유도NK세포적활성,MTT법측정HSP70-TKD유도적NK세포대HepG2화람향희처리적HepGZ세포적살상활성.결과:건립료종인PBMC체외확증CD3-CD56+NK세포체계:이SCGM위기출배양기,재600 U/mL IL-2、500 μg/L항CD3단항화50 mg/L PHA연합작용하,배양14 d세포확증료116배,사유(66.97±8.76)%CD3-CD56+NK세포;HSP70-TKD유도적NK세포대HepG2살상활성저.여미경TKD유도적NK세포지간차이무통계학의의,P=0.298;이대세향희처리과적HepG2살상활성고,유도조여미유도조지간차이유통계학의의,P=0.008;당TKD농도위2.0 mg/L시,살상활성최고위(58.8±3.4)%.결론:이간세포생장배양기위기출배양기,재항CD3단항화IL-2협동자격하체외대량확증NK세포,HSP70-TKD유도적NK세포대세포막HSP70양성적종류세포살상활성고,이대우세포막HSP70저표체적종류세포살상활성저.