中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2010年
5期
687-690
,共4页
石晓路%柳絮%郭会彩%张丽男%勾向博%熊晨%苏倩%王永利
石曉路%柳絮%郭會綵%張麗男%勾嚮博%熊晨%囌倩%王永利
석효로%류서%곽회채%장려남%구향박%웅신%소천%왕영리
Langendorff%心肌细胞%细胞分离%终点判断%动缘检测%收缩
Langendorff%心肌細胞%細胞分離%終點判斷%動緣檢測%收縮
Langendorff%심기세포%세포분리%종점판단%동연검측%수축
目的 介绍一种易于判断酶解终点的分离大鼠心肌细胞的方法.方法 成年SD大鼠麻醉后开胸取出心脏,分别采用传统的Langendorff灌流装置和本实验室改进的Langendorff灌流装置,于恒温37℃灌流消化液(含0.6%胶原酶B,0.6% BSA,30 μmol·L-1 Ca2+的台氏液)分离细胞,并采用IonOptix单细胞动缘检测系统检测细胞功能.结果 传统的Langendorff灌流装置分离细胞,酶解时间约13～16 min,但此法终点难以判断,每次分离的细胞质量差别较大,且不耐钙,收缩的稳定性较差.而以改进的Langendorff灌流装置分离细胞易于确定消化终点,细胞成活率大于80%,在含1.8 mmol·L-1 Ca2+的台氏液中存活率也高达50%.给予电压15 V、频率1 Hz、波宽4 ms的持续电刺激时,其在1 000 s内收缩舒张功能稳定.结论 经改造的Langendorff灌流装置分离的心肌细胞成活率高,可控性强,结果稳定,能够更好地用于检测细胞收缩舒张功能的实验.
目的 介紹一種易于判斷酶解終點的分離大鼠心肌細胞的方法.方法 成年SD大鼠痳醉後開胸取齣心髒,分彆採用傳統的Langendorff灌流裝置和本實驗室改進的Langendorff灌流裝置,于恆溫37℃灌流消化液(含0.6%膠原酶B,0.6% BSA,30 μmol·L-1 Ca2+的檯氏液)分離細胞,併採用IonOptix單細胞動緣檢測繫統檢測細胞功能.結果 傳統的Langendorff灌流裝置分離細胞,酶解時間約13～16 min,但此法終點難以判斷,每次分離的細胞質量差彆較大,且不耐鈣,收縮的穩定性較差.而以改進的Langendorff灌流裝置分離細胞易于確定消化終點,細胞成活率大于80%,在含1.8 mmol·L-1 Ca2+的檯氏液中存活率也高達50%.給予電壓15 V、頻率1 Hz、波寬4 ms的持續電刺激時,其在1 000 s內收縮舒張功能穩定.結論 經改造的Langendorff灌流裝置分離的心肌細胞成活率高,可控性彊,結果穩定,能夠更好地用于檢測細胞收縮舒張功能的實驗.
목적 개소일충역우판단매해종점적분리대서심기세포적방법.방법 성년SD대서마취후개흉취출심장,분별채용전통적Langendorff관류장치화본실험실개진적Langendorff관류장치,우항온37℃관류소화액(함0.6%효원매B,0.6% BSA,30 μmol·L-1 Ca2+적태씨액)분리세포,병채용IonOptix단세포동연검측계통검측세포공능.결과 전통적Langendorff관류장치분리세포,매해시간약13～16 min,단차법종점난이판단,매차분리적세포질량차별교대,차불내개,수축적은정성교차.이이개진적Langendorff관류장치분리세포역우학정소화종점,세포성활솔대우80%,재함1.8 mmol·L-1 Ca2+적태씨액중존활솔야고체50%.급여전압15 V、빈솔1 Hz、파관4 ms적지속전자격시,기재1 000 s내수축서장공능은정.결론 경개조적Langendorff관류장치분리적심기세포성활솔고,가공성강,결과은정,능구경호지용우검측세포수축서장공능적실험.
