CAJ | 학술논문

目的应用LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)技术鉴别含89K毒力岛2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,S.suis 2)菌株.方法根据S.suis 2中国分离株(05ZYH33)89K毒力岛中基因序列设计4条引物(2条内引物、2条外引物);应用LAMP,对21株S.suis 2、18株其它链球菌、9株葡萄球菌、5株其它菌株及49份未知样本进行检测,并对LAMP的最低检测限进行测试,结果通过肉眼目测或电泳检测,并将结果与PCR/定量PCR结果比较.结果该方法仅对含89K毒力岛的中国S.suis 2特有株检测为阳性,而其它菌株经LAMP检测均为阴性,试验表明本方法特异性好,其最低检测限为24CFU/反应,无需特殊设备,结果通过肉眼即可判断,从菌株核酸的提取至检测完成仅需2h左右.应用本方法对49份不同来源样本进行实际考核,其中32份不明发热病人呼吸道咽拭子应急样本及15份正常猪扁桃体咽拭子样本经检测89K毒力岛基因均为阴性,2份疑似SS2病人血液应急样本中一份检测到该毒力岛基因,该结果与普通PCR/定量PCR检测结果一致.结论成功建立了检测S.suis 2 89K毒力岛的LAMP方法,该方法特异性好,操作简便,无需特殊的仪器设备,操作简单方便,极适合在我国广大基层实验室(包括基层医院/动物检疫等部门)开展应用.
목적 응용LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)기술감별함89K독력도2형저련구균(Streptococcus suis serotype 2,S.suis 2)균주.방법 근거S.suis 2중국분리주(05ZYH33)89K독력도중기인서렬설계4조인물(2조내인물、2조외인물);응용LAMP,대21주S.suis 2、18주기타련구균、9주포도구균、5주기타균주급49빈미지양본진행검측,병대LAMP적최저검측한진행측시,결과통과육안목측혹전영검측,병장결과여PCR/정량PCR결과비교.결과 해방법부대함89K독력도적중국S.suis 2특유주검측위양성,이기타균주경LAMP검측균위음성,시험표명본방법특이성호,기최저검측한위24CFU/반응,무수특수설비,결과통과육안즉가판단,종균주핵산적제취지검측완성부수2h좌우.응용본방법대49빈불동래원양본진행실제고핵,기중32빈불명발열병인호흡도인식자응급양본급15빈정상저편도체인식자양본경검측89K독력도기인균위음성,2빈의사SS2병인혈액응급양본중일빈검측도해독력도기인,해결과여보통PCR/정량PCR검측결과일치.결론 성공건립료검측S.suis 2 89K독력도적LAMP방법,해방법특이성호,조작간편,무수특수적의기설비,조작간단방편,겁괄합재아국엄대기층실험실(포괄기층의원/동물검역등부문)개전응용.