生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2010年
5期
677-680
,共4页
施庆国%李山虎%钱晓龙%周建光
施慶國%李山虎%錢曉龍%週建光
시경국%리산호%전효룡%주건광
重组酶Exo%蛋白纯化%多克隆抗体制备
重組酶Exo%蛋白純化%多剋隆抗體製備
중조매Exo%단백순화%다극륭항체제비
目的:纯化Exo重组酶融合蛋白并制备相应抗体.方法:用阴离子交换柱对蛋白进行初步纯化,然后用Ni-NTA介质填充的层析柱分离纯化含His标签的融合蛋白,用谷胱甘肽琼脂糖4B介质填充的层析柱分离纯化GST融合蛋白;二次纯化的蛋白利用硝酸纤维素膜结合法制备抗原蛋白并免疫实验动物.结果:ELISA结果显示血清抗体效价可达到1:12 800,说明通过Western免疫印迹自制的多克隆抗体能特异地与Exo重组蛋白相互作用.结论:该蛋白纯化方法操作简单,制备的抗原纯度高,多克隆抗体特异性好.
目的:純化Exo重組酶融閤蛋白併製備相應抗體.方法:用陰離子交換柱對蛋白進行初步純化,然後用Ni-NTA介質填充的層析柱分離純化含His標籤的融閤蛋白,用穀胱甘肽瓊脂糖4B介質填充的層析柱分離純化GST融閤蛋白;二次純化的蛋白利用硝痠纖維素膜結閤法製備抗原蛋白併免疫實驗動物.結果:ELISA結果顯示血清抗體效價可達到1:12 800,說明通過Western免疫印跡自製的多剋隆抗體能特異地與Exo重組蛋白相互作用.結論:該蛋白純化方法操作簡單,製備的抗原純度高,多剋隆抗體特異性好.
목적:순화Exo중조매융합단백병제비상응항체.방법:용음리자교환주대단백진행초보순화,연후용Ni-NTA개질전충적층석주분리순화함His표첨적융합단백,용곡광감태경지당4B개질전충적층석주분리순화GST융합단백;이차순화적단백이용초산섬유소막결합법제비항원단백병면역실험동물.결과:ELISA결과현시혈청항체효개가체도1:12 800,설명통과Western면역인적자제적다극륭항체능특이지여Exo중조단백상호작용.결론:해단백순화방법조작간단,제비적항원순도고,다극륭항체특이성호.
