CAJ | 학술논문

目的构建在视网膜组织特异性表达的人血管内皮生长因子(VEGF)165基因. 方法用聚合酶链反应(PCR)方法从BLAB/C鼠全基因组扩增能在视网膜组织特异性表达的rho启动子,经限制性内切酶纯化后克隆于质粒pcDNA3.1+-VEGF165中,建立重组质粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165,通过限制性内切酶酶切分析及PCR鉴定筛选出正确重组质粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165,由jetPEI介导转染人视网膜色素上皮细胞和人脐静脉内皮细胞,并通过免疫组织化学染色以及绘制细胞生长曲线检测在人视网膜色素上皮细胞和人脐静脉内皮细胞中VEGF蛋白的表达. 结果在人视网膜色素上皮细胞中,重组质粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165比质粒pcDNA3.1+-VEGF165的VEGF蛋白表达强,在人脐静脉内皮细胞,两者的表达量无明显差别. 结论载体pcDNA3.1+-rho-VEGF165的构建为进一步研究VEGF在视网膜新生血管形成中的致病机理提供基础材料,并为进一步建立视网膜特异性表达VEGF转基因鼠模型建立了基础.
목적구건재시망막조직특이성표체적인혈관내피생장인자(VEGF)165기인. 방법용취합매련반응(PCR)방법종BLAB/C서전기인조확증능재시망막조직특이성표체적rho계동자,경한제성내절매순화후극륭우질립pcDNA3.1+-VEGF165중,건립중조질립pcDNA3.1+-rho-VEGF165,통과한제성내절매매절분석급PCR감정사선출정학중조질립pcDNA3.1+-rho-VEGF165,유jetPEI개도전염인시망막색소상피세포화인제정맥내피세포,병통과면역조직화학염색이급회제세포생장곡선검측재인시망막색소상피세포화인제정맥내피세포중VEGF단백적표체. 결과재인시망막색소상피세포중,중조질립pcDNA3.1+-rho-VEGF165비질립pcDNA3.1+-VEGF165적VEGF단백표체강,재인제정맥내피세포,량자적표체량무명현차별. 결론재체pcDNA3.1+-rho-VEGF165적구건위진일보연구VEGF재시망막신생혈관형성중적치병궤리제공기출재료,병위진일보건립시망막특이성표체VEGF전기인서모형건립료기출.