CAJ | 학술논문

目的:探讨腺相关病毒载体介导的磷酸受纳蛋白(PLB)反义RNA对肌浆网Ca2+-ATPase活性以及细胞内钙浓度([Ca2+]i)的作用.方法:构建PLB反义RNA的重组腺相关病毒载体(rAAV-asPLB)和携带报告基因LacZ的重组腺相关病毒载体(rAAV-LacZ).分别转染培养的大鼠心肌细胞,测定PLB mRNA和蛋白质表达,检测肌浆网Ca2+-ATPase活性和[Ca2+]i.结果:RT-PCR和Western blotting显示,感染rAAV-asPLB的心肌细胞的PLBmRNA和蛋白质表达低于正常对照和感染rAAV-LacZ组;而Ca2+-ATPase活性大于正常对照和感染rAAV-LacZ组.激光共聚焦显微镜检测显示,静息状态时,rAAv-asPLB感染组[Ca2+]i降低;异丙肾上腺素刺激后,各组[Ca2+]i均升高,但是rAAV-asPLB感染组[Ca2+]i变化幅度大.结论:腺相关病毒介导的PLB反义RNA对大鼠心肌细胞PLB表达具有抑制作用,增强Ca2--ATPase活性,降低静息状态的[Ca2+]i,增加异丙肾上腺素刺激后[Ca2+]i的变化幅度.
목적:탐토선상관병독재체개도적린산수납단백(PLB)반의RNA대기장망Ca2+-ATPase활성이급세포내개농도([Ca2+]i)적작용.방법:구건PLB반의RNA적중조선상관병독재체(rAAV-asPLB)화휴대보고기인LacZ적중조선상관병독재체(rAAV-LacZ).분별전염배양적대서심기세포,측정PLB mRNA화단백질표체,검측기장망Ca2+-ATPase활성화[Ca2+]i.결과:RT-PCR화Western blotting현시,감염rAAV-asPLB적심기세포적PLBmRNA화단백질표체저우정상대조화감염rAAV-LacZ조;이Ca2+-ATPase활성대우정상대조화감염rAAV-LacZ조.격광공취초현미경검측현시,정식상태시,rAAv-asPLB감염조[Ca2+]i강저;이병신상선소자격후,각조[Ca2+]i균승고,단시rAAV-asPLB감염조[Ca2+]i변화폭도대.결론:선상관병독개도적PLB반의RNA대대서심기세포PLB표체구유억제작용,증강Ca2--ATPase활성,강저정식상태적[Ca2+]i,증가이병신상선소자격후[Ca2+]i적변화폭도.