天津医科大学学报
天津醫科大學學報
천진의과대학학보
JOURNAL OF TIANJIN MEDICAL UNIVERSITY
2007年
1期
65-68
,共4页
马明全%姜宏景%李慧%于津浦%魏枫%任秀宝
馬明全%薑宏景%李慧%于津浦%魏楓%任秀寶
마명전%강굉경%리혜%우진포%위풍%임수보
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子%肿瘤疫苗%巢式PCR
粒細胞巨噬細胞集落刺激因子%腫瘤疫苗%巢式PCR
립세포거서세포집락자격인자%종류역묘%소식PCR
目的:构建一个含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因,并能够用于鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(mGM-CSF)基因修饰性肿瘤疫苗研究的质粒载体.方法:利用常规分子生物学方法设计并构建含有一个mGM-CSF基因和一个EGFP基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-mGM质粒,经EcoR Ⅰ及BamH Ⅰ双酶切鉴定并测序.通过脂质体法转染LA795肺癌细胞,用荧光显微镜检测细胞中EGFP的表达,用ELISA法检测细胞中mGM-CSF的表达.结果:构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-mGM,用脂质体法转染LA795肺癌细胞后,经荧光显微镜和ELISA法检测,可见细胞内有EGFP及mGM-CSF的表达.结论:成功地构建真核表达载体pIRES2-EGFP-mGM,并在LA795肺癌细胞中表达,为研究GM-CSF对肿瘤的生物学作用以及GM-CSF在基因修饰性肿瘤疫苗中的应用奠定了基础.
目的:構建一箇含有增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)報告基因,併能夠用于鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(mGM-CSF)基因脩飾性腫瘤疫苗研究的質粒載體.方法:利用常規分子生物學方法設計併構建含有一箇mGM-CSF基因和一箇EGFP基因的真覈錶達載體pIRES2-EGFP-mGM質粒,經EcoR Ⅰ及BamH Ⅰ雙酶切鑒定併測序.通過脂質體法轉染LA795肺癌細胞,用熒光顯微鏡檢測細胞中EGFP的錶達,用ELISA法檢測細胞中mGM-CSF的錶達.結果:構建瞭真覈錶達載體pIRES2-EGFP-mGM,用脂質體法轉染LA795肺癌細胞後,經熒光顯微鏡和ELISA法檢測,可見細胞內有EGFP及mGM-CSF的錶達.結論:成功地構建真覈錶達載體pIRES2-EGFP-mGM,併在LA795肺癌細胞中錶達,為研究GM-CSF對腫瘤的生物學作用以及GM-CSF在基因脩飾性腫瘤疫苗中的應用奠定瞭基礎.
목적:구건일개함유증강형록색형광단백(EGFP)보고기인,병능구용우서립세포거서세포집락자격인자(mGM-CSF)기인수식성종류역묘연구적질립재체.방법:이용상규분자생물학방법설계병구건함유일개mGM-CSF기인화일개EGFP기인적진핵표체재체pIRES2-EGFP-mGM질립,경EcoR Ⅰ급BamH Ⅰ쌍매절감정병측서.통과지질체법전염LA795폐암세포,용형광현미경검측세포중EGFP적표체,용ELISA법검측세포중mGM-CSF적표체.결과:구건료진핵표체재체pIRES2-EGFP-mGM,용지질체법전염LA795폐암세포후,경형광현미경화ELISA법검측,가견세포내유EGFP급mGM-CSF적표체.결론:성공지구건진핵표체재체pIRES2-EGFP-mGM,병재LA795폐암세포중표체,위연구GM-CSF대종류적생물학작용이급GM-CSF재기인수식성종류역묘중적응용전정료기출.
