麦类作物学报
麥類作物學報
맥류작물학보
JOURNAL OF TRITICEAE CROPS
2007年
4期
613-618
,共6页
韩兆雪%吴芳%赵桃%杨凡%钱刚%余懋群
韓兆雪%吳芳%趙桃%楊凡%錢剛%餘懋群
한조설%오방%조도%양범%전강%여무군
青稞%B-hordein基因%上游调控序列%TAIL-PCR%序列分析
青稞%B-hordein基因%上遊調控序列%TAIL-PCR%序列分析
청과%B-hordein기인%상유조공서렬%TAIL-PCR%서렬분석
为了阐明青稞种子中B组醇溶蛋白合成的遗传调控机制,为分子改良大麦和小麦籽粒品质奠定基础,以青稞品种Z09和Z26的基因组DNA为模板,根据已克隆的青稞B组醇溶蛋白(B-hordein)基因的5'端序列设计三个基因特异的反向引物,分别与随机简并引物配对,进行热不对称嵌套PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)扩增,从两份西藏青稞材料中分离克隆出2个B-hordein基因的上游调控序列.序列测定结果表明,两个扩增片段长度分别为395和396 bp,加上已知B-hordein基因中的GSP2引物序列与翻译起始密码子之间198 bp的长度,则可得到约600 bp的B-hordein基因5'上游调控序列.将所得序列与Genbank中的三个贮藏蛋白基因的对应区段进行序列比对,所得序列与来自野生智利大麦(H.chilense)的B3-hordein基因(Genbank登录号:AY998010)、普通小麦(T.aestivum)的低分子量麦谷蛋白亚基基因(Genbank登录号:X07747)和栽培大麦(H.vulgare)的B-hordein基因(Genbank登录号:X03103)具有81%～95%的序列相似性.推测其TATA box位于-80 bp,CAAT-like box位于-140 bp处.另外,在-300 bp处存在一个胚乳盒(Endosperm Box,EB),包含EM基序和GCN4基序.EM基序高度保守,GCN4基序有一个核苷酸位点的突变.此外,在约-560 bp处存在一个胚乳盒类似结构.
為瞭闡明青稞種子中B組醇溶蛋白閤成的遺傳調控機製,為分子改良大麥和小麥籽粒品質奠定基礎,以青稞品種Z09和Z26的基因組DNA為模闆,根據已剋隆的青稞B組醇溶蛋白(B-hordein)基因的5'耑序列設計三箇基因特異的反嚮引物,分彆與隨機簡併引物配對,進行熱不對稱嵌套PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)擴增,從兩份西藏青稞材料中分離剋隆齣2箇B-hordein基因的上遊調控序列.序列測定結果錶明,兩箇擴增片段長度分彆為395和396 bp,加上已知B-hordein基因中的GSP2引物序列與翻譯起始密碼子之間198 bp的長度,則可得到約600 bp的B-hordein基因5'上遊調控序列.將所得序列與Genbank中的三箇貯藏蛋白基因的對應區段進行序列比對,所得序列與來自野生智利大麥(H.chilense)的B3-hordein基因(Genbank登錄號:AY998010)、普通小麥(T.aestivum)的低分子量麥穀蛋白亞基基因(Genbank登錄號:X07747)和栽培大麥(H.vulgare)的B-hordein基因(Genbank登錄號:X03103)具有81%～95%的序列相似性.推測其TATA box位于-80 bp,CAAT-like box位于-140 bp處.另外,在-300 bp處存在一箇胚乳盒(Endosperm Box,EB),包含EM基序和GCN4基序.EM基序高度保守,GCN4基序有一箇覈苷痠位點的突變.此外,在約-560 bp處存在一箇胚乳盒類似結構.
위료천명청과충자중B조순용단백합성적유전조공궤제,위분자개량대맥화소맥자립품질전정기출,이청과품충Z09화Z26적기인조DNA위모판,근거이극륭적청과B조순용단백(B-hordein)기인적5'단서렬설계삼개기인특이적반향인물,분별여수궤간병인물배대,진행열불대칭감투PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)확증,종량빈서장청과재료중분리극륭출2개B-hordein기인적상유조공서렬.서렬측정결과표명,량개확증편단장도분별위395화396 bp,가상이지B-hordein기인중적GSP2인물서렬여번역기시밀마자지간198 bp적장도,칙가득도약600 bp적B-hordein기인5'상유조공서렬.장소득서렬여Genbank중적삼개저장단백기인적대응구단진행서렬비대,소득서렬여래자야생지리대맥(H.chilense)적B3-hordein기인(Genbank등록호:AY998010)、보통소맥(T.aestivum)적저분자량맥곡단백아기기인(Genbank등록호:X07747)화재배대맥(H.vulgare)적B-hordein기인(Genbank등록호:X03103)구유81%～95%적서렬상사성.추측기TATA box위우-80 bp,CAAT-like box위우-140 bp처.령외,재-300 bp처존재일개배유합(Endosperm Box,EB),포함EM기서화GCN4기서.EM기서고도보수,GCN4기서유일개핵감산위점적돌변.차외,재약-560 bp처존재일개배유합유사결구.
