中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2007年
11期
865-869
,共5页
王延辉%薛飞%朱远茂%彭伍平
王延輝%薛飛%硃遠茂%彭伍平
왕연휘%설비%주원무%팽오평
牛传染性鼻气管炎病毒%gD糖蛋白%原核表达%活性检测
牛傳染性鼻氣管炎病毒%gD糖蛋白%原覈錶達%活性檢測
우전염성비기관염병독%gD당단백%원핵표체%활성검측
经生物学软件DNAStar分析,以牛传染性鼻气管炎病毒(Bartha Nu/67)基因组DNA为模板,PCR扩增gD基因943 bp的片段,将目的片段定向克隆到pET30a表达载体中,酶切及测序鉴定均正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导得到部分可溶表达的重组蛋白.用Ni柱亲和层析法在非变性的条件下纯化重组蛋白,纯化的重组蛋白浓度为0.852 mg/mL,纯度为85.2%.Western blot、间接ELISA检测证明纯化的重组蛋白具有良好的抗原性和特异性.
經生物學軟件DNAStar分析,以牛傳染性鼻氣管炎病毒(Bartha Nu/67)基因組DNA為模闆,PCR擴增gD基因943 bp的片段,將目的片段定嚮剋隆到pET30a錶達載體中,酶切及測序鑒定均正確後,轉化BL21錶達菌,經IPTG誘導得到部分可溶錶達的重組蛋白.用Ni柱親和層析法在非變性的條件下純化重組蛋白,純化的重組蛋白濃度為0.852 mg/mL,純度為85.2%.Western blot、間接ELISA檢測證明純化的重組蛋白具有良好的抗原性和特異性.
경생물학연건DNAStar분석,이우전염성비기관염병독(Bartha Nu/67)기인조DNA위모판,PCR확증gD기인943 bp적편단,장목적편단정향극륭도pET30a표체재체중,매절급측서감정균정학후,전화BL21표체균,경IPTG유도득도부분가용표체적중조단백.용Ni주친화층석법재비변성적조건하순화중조단백,순화적중조단백농도위0.852 mg/mL,순도위85.2%.Western blot、간접ELISA검측증명순화적중조단백구유량호적항원성화특이성.
