西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2009年
2期
154-157
,共4页
张学军%王志方%周小云%艾秀莲
張學軍%王誌方%週小雲%艾秀蓮
장학군%왕지방%주소운%애수련
磷脂酰乙醇胺结合蛋白%真核表达%低温诱导%雪莲
燐脂酰乙醇胺結閤蛋白%真覈錶達%低溫誘導%雪蓮
린지선을순알결합단백%진핵표체%저온유도%설련
为了构建雪莲类PEBP基因真核表达载体,在毕赤酵母中表达并鉴定.将雪莲类PEBP基因开放阅读框序列克隆到真核表达载体pPIC9k上,转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115细胞内,利用筛选到的Muts(methanol utilization slow)重组酵母株进行表达,经SDS-PAGE分析,表达产物置于低温条件下进行抗冻试验.结果在培养基上清液中含有一明显的特异性蛋白条带,大小为20 kD,与预期相符,上清液抗冻检测表明PEBP具有一定的抗冻性,表明该基因在毕赤酵母GS115中得到了表达.该研究成功构建了真核表达载体pPIC9k-PEBP,获得了表达产物,并为进一步研究雪莲类PEBP基因的抗冻功能打下基础.
為瞭構建雪蓮類PEBP基因真覈錶達載體,在畢赤酵母中錶達併鑒定.將雪蓮類PEBP基因開放閱讀框序列剋隆到真覈錶達載體pPIC9k上,轉化到畢赤酵母(Pichia pastoris)GS115細胞內,利用篩選到的Muts(methanol utilization slow)重組酵母株進行錶達,經SDS-PAGE分析,錶達產物置于低溫條件下進行抗凍試驗.結果在培養基上清液中含有一明顯的特異性蛋白條帶,大小為20 kD,與預期相符,上清液抗凍檢測錶明PEBP具有一定的抗凍性,錶明該基因在畢赤酵母GS115中得到瞭錶達.該研究成功構建瞭真覈錶達載體pPIC9k-PEBP,穫得瞭錶達產物,併為進一步研究雪蓮類PEBP基因的抗凍功能打下基礎.
위료구건설련류PEBP기인진핵표체재체,재필적효모중표체병감정.장설련류PEBP기인개방열독광서렬극륭도진핵표체재체pPIC9k상,전화도필적효모(Pichia pastoris)GS115세포내,이용사선도적Muts(methanol utilization slow)중조효모주진행표체,경SDS-PAGE분석,표체산물치우저온조건하진행항동시험.결과재배양기상청액중함유일명현적특이성단백조대,대소위20 kD,여예기상부,상청액항동검측표명PEBP구유일정적항동성,표명해기인재필적효모GS115중득도료표체.해연구성공구건료진핵표체재체pPIC9k-PEBP,획득료표체산물,병위진일보연구설련류PEBP기인적항동공능타하기출.
