广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
13期
126-127,134
,共3页
尚常花%朱顺妮%袁振宏%王忠铭
尚常花%硃順妮%袁振宏%王忠銘
상상화%주순니%원진굉%왕충명
巴夫杜氏藻%GAPDH基因%克隆
巴伕杜氏藻%GAPDH基因%剋隆
파부두씨조%GAPDH기인%극륭
3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是糖酵解途径中的一个关键酶,由于其基因表达量相对恒定.因此在定量和半定量PCR试验中常被用作内源参照基因来确定目标基因的相对表达量.从巴夫杜氏藻(Dunaliella pmva)中克隆GA PDH基因,并对基因序列进行了分析.以巴夫杜氏藻cDNA为模板,根据GAPDH的保守序列设计引物,PCR扩增获得了673 bp的cDNA序列.在此基础上,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,获得了913 bp的3'-cDNA序列,进而获得了cDNA部分序列1 393 bp.序列分析结果表明:巴夫杜氏藻GAPDH cDNA部分序列包括1 055 bp的编码区和338 bp的3‘非翻译区.该基因的克隆为半定量和定量PCR等技术在巴夫杜氏藻分子生物学研究中的应用提供了内源参照基因.
3-燐痠甘油醛脫氫酶(GAPDH)是糖酵解途徑中的一箇關鍵酶,由于其基因錶達量相對恆定.因此在定量和半定量PCR試驗中常被用作內源參照基因來確定目標基因的相對錶達量.從巴伕杜氏藻(Dunaliella pmva)中剋隆GA PDH基因,併對基因序列進行瞭分析.以巴伕杜氏藻cDNA為模闆,根據GAPDH的保守序列設計引物,PCR擴增穫得瞭673 bp的cDNA序列.在此基礎上,採用cDNA末耑快速擴增(RACE)技術,穫得瞭913 bp的3'-cDNA序列,進而穫得瞭cDNA部分序列1 393 bp.序列分析結果錶明:巴伕杜氏藻GAPDH cDNA部分序列包括1 055 bp的編碼區和338 bp的3‘非翻譯區.該基因的剋隆為半定量和定量PCR等技術在巴伕杜氏藻分子生物學研究中的應用提供瞭內源參照基因.
3-린산감유철탈경매(GAPDH)시당효해도경중적일개관건매,유우기기인표체량상대항정.인차재정량화반정량PCR시험중상피용작내원삼조기인래학정목표기인적상대표체량.종파부두씨조(Dunaliella pmva)중극륭GA PDH기인,병대기인서렬진행료분석.이파부두씨조cDNA위모판,근거GAPDH적보수서렬설계인물,PCR확증획득료673 bp적cDNA서렬.재차기출상,채용cDNA말단쾌속확증(RACE)기술,획득료913 bp적3'-cDNA서렬,진이획득료cDNA부분서렬1 393 bp.서렬분석결과표명:파부두씨조GAPDH cDNA부분서렬포괄1 055 bp적편마구화338 bp적3‘비번역구.해기인적극륭위반정량화정량PCR등기술재파부두씨조분자생물학연구중적응용제공료내원삼조기인.
