中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
8期
630-634
,共5页
姬希文%闫丽萍%颜丕熙%李国新%张七斤%李泽君
姬希文%閆麗萍%顏丕熙%李國新%張七斤%李澤君
희희문%염려평%안비희%리국신%장칠근%리택군
鸭坦布苏病毒%间接ELISA%抗体
鴨坦佈囌病毒%間接ELISA%抗體
압탄포소병독%간접ELISA%항체
为建立快速检测鸭坦布苏病毒(DTV)的血清学方法,本研究利用纯化的DTV奉贤株(FX2010)作为包被抗原,建立了检测DTV血清抗体的间接ELISA方法,并且对各种检测条件进行了优化.优化后确定的抗原最适包被浓度为1.675 μg/孔,抗原最佳包被条件为37℃放置2h后,4℃下过夜,血清的最佳稀释度为1:200,酶标抗体最适稀释度为1∶2 000.在优化条件下,阴阳性临界值判定标准为0.432.用建立的间接ELISA方法对禽流感病毒、新城疫病毒、网状内皮增生病病毒、I型鸭肝炎病毒、呼肠孤病毒、禽白血病病毒阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.批内和批间重复试验的最大变异系数分别为2.9%和3.9%,显示该方法具有很好的稳定性.用间接ELISA方法对140份疑似鸭坦布苏病血清样品进行检测,有108份样品呈现阳性,而琼扩试验只有32份呈阳性结果,而且用该方法检测的阳性样品包括了琼扩试验的阳性样品,证明该方法具有较高的敏感性和特异性.本研究快速检测DTV抗体间接ELISA的建立为该病的诊断和流行病学调查提供了新的方法.
為建立快速檢測鴨坦佈囌病毒(DTV)的血清學方法,本研究利用純化的DTV奉賢株(FX2010)作為包被抗原,建立瞭檢測DTV血清抗體的間接ELISA方法,併且對各種檢測條件進行瞭優化.優化後確定的抗原最適包被濃度為1.675 μg/孔,抗原最佳包被條件為37℃放置2h後,4℃下過夜,血清的最佳稀釋度為1:200,酶標抗體最適稀釋度為1∶2 000.在優化條件下,陰暘性臨界值判定標準為0.432.用建立的間接ELISA方法對禽流感病毒、新城疫病毒、網狀內皮增生病病毒、I型鴨肝炎病毒、呼腸孤病毒、禽白血病病毒暘性血清進行瞭檢測,均無交扠反應,錶明該方法具有良好的特異性.批內和批間重複試驗的最大變異繫數分彆為2.9%和3.9%,顯示該方法具有很好的穩定性.用間接ELISA方法對140份疑似鴨坦佈囌病血清樣品進行檢測,有108份樣品呈現暘性,而瓊擴試驗隻有32份呈暘性結果,而且用該方法檢測的暘性樣品包括瞭瓊擴試驗的暘性樣品,證明該方法具有較高的敏感性和特異性.本研究快速檢測DTV抗體間接ELISA的建立為該病的診斷和流行病學調查提供瞭新的方法.
위건립쾌속검측압탄포소병독(DTV)적혈청학방법,본연구이용순화적DTV봉현주(FX2010)작위포피항원,건립료검측DTV혈청항체적간접ELISA방법,병차대각충검측조건진행료우화.우화후학정적항원최괄포피농도위1.675 μg/공,항원최가포피조건위37℃방치2h후,4℃하과야,혈청적최가희석도위1:200,매표항체최괄희석도위1∶2 000.재우화조건하,음양성림계치판정표준위0.432.용건립적간접ELISA방법대금류감병독、신성역병독、망상내피증생병병독、I형압간염병독、호장고병독、금백혈병병독양성혈청진행료검측,균무교차반응,표명해방법구유량호적특이성.비내화비간중복시험적최대변이계수분별위2.9%화3.9%,현시해방법구유흔호적은정성.용간접ELISA방법대140빈의사압탄포소병혈청양품진행검측,유108빈양품정현양성,이경확시험지유32빈정양성결과,이차용해방법검측적양성양품포괄료경확시험적양성양품,증명해방법구유교고적민감성화특이성.본연구쾌속검측DTV항체간접ELISA적건립위해병적진단화류행병학조사제공료신적방법.