中华眼视光学与视觉科学杂志
中華眼視光學與視覺科學雜誌
중화안시광학여시각과학잡지
CHINESE JOURNAL OF OPTOMETRY OPHTHALMOLOGY AND VISUAL SCIENCE
2010年
3期
199-203
,共5页
安建宏%丁阳%周仲楼%周翔天
安建宏%丁暘%週仲樓%週翔天
안건굉%정양%주중루%주상천
腺苷%葡萄膜%黑色素瘤,葡萄膜肿瘤%细胞增殖
腺苷%葡萄膜%黑色素瘤,葡萄膜腫瘤%細胞增殖
선감%포도막%흑색소류,포도막종류%세포증식
Adenosine%Uvea%Melanoma,uveal neoplasms%Cell proliferation
目的 探讨腺苷受体在正常人葡萄膜黑色素细胞和葡萄膜黑色素瘤细胞中的表达以及腺苷对其细胞增殖能力的影响.方法 体外培养正常人葡萄膜黑色素细胞(U95)和葡萄膜黑色素瘤细胞(S65).采用Real-time PCR检测4种不同亚型腺苷受体(A1、A2A、A2B、A3)mRNA在U95和S65中的表达情况.以0、0.1、1、10和100 μmol/L的腺苷分别作用U95和S65细胞24 h和48 h后,采用MTT法检测细胞光密度值和抑制率,分析不同时间、不同浓度的腺苷对U95和S65增殖能力的影响.对上述所得数据进行单因素方差分析或独立样本t检验.结果 U95和S65细胞中4种类型腺苷受体A1、A2A、A2B、A3的mRNA均有表达.在U95细胞中,A1、A2A、A2B、A3受体mRNA表达值分别为1.32±0.47、0.28±0.05、1.03±0.10、0.20±0.07,四者之间差异有统计学意义(F=15.90,P<0.01),A1和A2B的mRNA表达水平相似,且明显高于A2A和A3的表达;在S65细胞中,A1、A2A、A2B、A3受体mRNA表达值分别为1.03±0.27、2.23±0.35、127.34±18.69、0.17±0.07,四者之间差异有统计学意义(F=163.20,P<0.01),A2BmRNA表达水平明显高于其他3种腺苷受体亚型.A2A和A2B在S65中的表达明显高于其在U95中的表达量(A2A:t=9.35,P<0.01;A2B:t=11.43,P<0.01).作用时间24 h,0.1、1、10和100μmol/L腺苷对S65细胞的抑制率分别为3.47%、14.93%、19.79%和26.04%;作用时间48 h,各浓度腺苷对S65细胞的抑制率分别为11.43%、23.10%、34.76%和46.67%;随着腺苷浓度的增高,S65细胞的增殖受到明显的抑制,呈现明显的浓度效应依赖关系.而腺苷对U95细胞的增殖无明显影响.结论 腺苷能够明显抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,但不影响正常葡萄膜黑色素细胞的生长.腺苷和/或腺苷受体激动剂也许可以作为一种新的药物用于葡萄膜黑色素瘤的治疗.
目的 探討腺苷受體在正常人葡萄膜黑色素細胞和葡萄膜黑色素瘤細胞中的錶達以及腺苷對其細胞增殖能力的影響.方法 體外培養正常人葡萄膜黑色素細胞(U95)和葡萄膜黑色素瘤細胞(S65).採用Real-time PCR檢測4種不同亞型腺苷受體(A1、A2A、A2B、A3)mRNA在U95和S65中的錶達情況.以0、0.1、1、10和100 μmol/L的腺苷分彆作用U95和S65細胞24 h和48 h後,採用MTT法檢測細胞光密度值和抑製率,分析不同時間、不同濃度的腺苷對U95和S65增殖能力的影響.對上述所得數據進行單因素方差分析或獨立樣本t檢驗.結果 U95和S65細胞中4種類型腺苷受體A1、A2A、A2B、A3的mRNA均有錶達.在U95細胞中,A1、A2A、A2B、A3受體mRNA錶達值分彆為1.32±0.47、0.28±0.05、1.03±0.10、0.20±0.07,四者之間差異有統計學意義(F=15.90,P<0.01),A1和A2B的mRNA錶達水平相似,且明顯高于A2A和A3的錶達;在S65細胞中,A1、A2A、A2B、A3受體mRNA錶達值分彆為1.03±0.27、2.23±0.35、127.34±18.69、0.17±0.07,四者之間差異有統計學意義(F=163.20,P<0.01),A2BmRNA錶達水平明顯高于其他3種腺苷受體亞型.A2A和A2B在S65中的錶達明顯高于其在U95中的錶達量(A2A:t=9.35,P<0.01;A2B:t=11.43,P<0.01).作用時間24 h,0.1、1、10和100μmol/L腺苷對S65細胞的抑製率分彆為3.47%、14.93%、19.79%和26.04%;作用時間48 h,各濃度腺苷對S65細胞的抑製率分彆為11.43%、23.10%、34.76%和46.67%;隨著腺苷濃度的增高,S65細胞的增殖受到明顯的抑製,呈現明顯的濃度效應依賴關繫.而腺苷對U95細胞的增殖無明顯影響.結論 腺苷能夠明顯抑製葡萄膜黑色素瘤細胞的增殖,但不影響正常葡萄膜黑色素細胞的生長.腺苷和/或腺苷受體激動劑也許可以作為一種新的藥物用于葡萄膜黑色素瘤的治療.
목적 탐토선감수체재정상인포도막흑색소세포화포도막흑색소류세포중적표체이급선감대기세포증식능력적영향.방법 체외배양정상인포도막흑색소세포(U95)화포도막흑색소류세포(S65).채용Real-time PCR검측4충불동아형선감수체(A1、A2A、A2B、A3)mRNA재U95화S65중적표체정황.이0、0.1、1、10화100 μmol/L적선감분별작용U95화S65세포24 h화48 h후,채용MTT법검측세포광밀도치화억제솔,분석불동시간、불동농도적선감대U95화S65증식능력적영향.대상술소득수거진행단인소방차분석혹독립양본t검험.결과 U95화S65세포중4충류형선감수체A1、A2A、A2B、A3적mRNA균유표체.재U95세포중,A1、A2A、A2B、A3수체mRNA표체치분별위1.32±0.47、0.28±0.05、1.03±0.10、0.20±0.07,사자지간차이유통계학의의(F=15.90,P<0.01),A1화A2B적mRNA표체수평상사,차명현고우A2A화A3적표체;재S65세포중,A1、A2A、A2B、A3수체mRNA표체치분별위1.03±0.27、2.23±0.35、127.34±18.69、0.17±0.07,사자지간차이유통계학의의(F=163.20,P<0.01),A2BmRNA표체수평명현고우기타3충선감수체아형.A2A화A2B재S65중적표체명현고우기재U95중적표체량(A2A:t=9.35,P<0.01;A2B:t=11.43,P<0.01).작용시간24 h,0.1、1、10화100μmol/L선감대S65세포적억제솔분별위3.47%、14.93%、19.79%화26.04%;작용시간48 h,각농도선감대S65세포적억제솔분별위11.43%、23.10%、34.76%화46.67%;수착선감농도적증고,S65세포적증식수도명현적억제,정현명현적농도효응의뢰관계.이선감대U95세포적증식무명현영향.결론 선감능구명현억제포도막흑색소류세포적증식,단불영향정상포도막흑색소세포적생장.선감화/혹선감수체격동제야허가이작위일충신적약물용우포도막흑색소류적치료.
Objective To investigate expression of adenosine receptors in uveal melanocytes and uveal melanoma cell, and the effect of adenosine on cell proliferation on these two types of cells. Methods Adenosine receptors (A1, A2A, A2B, A3) mRNA expression were detected in cultured uveal melanocytes cell U95 and uveal melanoma cell S65 by Real-time PCR. After U95 and S65 cells were treated with 0, 0.1, 1, 10 or 100 μLmol/L adenosine for 24 h or 48 h, cell viability of each group was measured by MTT. Results Four subtypes of adenosine receptors (A1, A2A, A2B and A3) mRNA were expressed in U95 and S65 cells. The expression of adenosine receptors A1 and A2B is similar to each other but higher than that of A2A and A3 in U95 cells (A1: 1.32±0.47; A2A: 0.28± 0.05; A2B: 1.03±0.10; A3: 0.20±0.07; F=15.90, P<0.01). The mRNA expression of adenosine receptor A2B was much higher than the three other subtypes of adenosine receptors in S65 cells (A1: 1.03±0.27; A2A: 2.23±0.35; A2B: 127.34±18.69; A3: 0.17±0.07; F:163.20, P<0.01). Adenosine receptor A2B and A2A mRNA expression was higher in S65 cells than in U95 cells (A2A: t=9.35, P< 0.01; A2B: t=11.43, P<0.01). After treated with 0, 0.1, 1, 10 and 100 μmol/L adenosine for 24 h and 48 h, S65 cells growth inhibition ratio were 3.47%, 14.93%, 19.79%, 26.04% at 24 h and 11.43%, 23.10%, 34.76%, 46.67% at 48 h. However different concentrations of adenosine had no effect on the proliferation of U95 cells. Conclusion The adenosine receptor subtypes express differently in uveal melanocytes and uveal melanoma cells. Adenosine is able to inhibit uveal melanoma cells proliferation, but has no effect on uveal melanocytes cells, which may be because of different adenosine receptor subtypes expression in these two types of cells.
