CAJ | 학술논문

背景:胚胎干细胞(ES细胞)是从体外受精胚囊的内细胞团分离建立的、具有发育全能性的细胞系,在特定条件下可向多种细胞分化,是细胞移植治疗很有前途的细胞来源.目的:探明ES细胞是否能被诱导分化为肝细胞,并探索小鼠ES细胞诱导分化为肝细胞的分化条件.方法:在ES细胞培养液中分别加入肝细胞生长因子(HGF)、β-神经细胞生长因子(NGF)和维甲酸(RA)以及与小鼠胎肝细胞共培养,观察分化细胞的形态学变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测白蛋白和转甲状腺蛋白mRNA水平的表达,免疫组化法检测甲胎蛋白和α1-抗胰蛋白酶蛋白水平的表达.结果:ES细胞培养液中加入HGF和β-NGF 15天后,分化出较多的上皮样细胞,并检测出白蛋白、转甲状腺蛋白mRNA水平的表达和甲胎蛋白、α1-抗胰蛋白酶蛋白水平的表达,表明ES细胞已诱导分化为肝细胞.ES细胞与胎肝细胞共培养2天后,分化出单一形态的上皮细胞,同样有上述肝细胞标志物的阳性表达.RA诱导出的细胞除转甲状腺蛋白mRNA外,无其他肝细胞标志物的阳性表达.结论:在HGF和β-NGF的作用下,有部分小鼠ES细胞被诱导为肝细胞,RA则无此作用.共培养方法也能诱导出肝细胞标志物阳性的细胞,并且细胞形态较单一.小鼠ES细胞有向肝细胞分化的潜能.
배경:배태간세포(ES세포)시종체외수정배낭적내세포단분리건립적、구유발육전능성적세포계,재특정조건하가향다충세포분화,시세포이식치료흔유전도적세포래원.목적:탐명ES세포시부능피유도분화위간세포,병탐색소서ES세포유도분화위간세포적분화조건.방법:재ES세포배양액중분별가입간세포생장인자(HGF)、β-신경세포생장인자(NGF)화유갑산(RA)이급여소서태간세포공배양,관찰분화세포적형태학변화,역전록취합매련반응(RT-PCR)검측백단백화전갑상선단백mRNA수평적표체,면역조화법검측갑태단백화α1-항이단백매단백수평적표체.결과:ES세포배양액중가입HGF화β-NGF 15천후,분화출교다적상피양세포,병검측출백단백、전갑상선단백mRNA수평적표체화갑태단백、α1-항이단백매단백수평적표체,표명ES세포이유도분화위간세포.ES세포여태간세포공배양2천후,분화출단일형태적상피세포,동양유상술간세포표지물적양성표체.RA유도출적세포제전갑상선단백mRNA외,무기타간세포표지물적양성표체.결론:재HGF화β-NGF적작용하,유부분소서ES세포피유도위간세포,RA칙무차작용.공배양방법야능유도출간세포표지물양성적세포,병차세포형태교단일.소서ES세포유향간세포분화적잠능.