四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2008年
2期
298-301
,共4页
郑雪莲%严茂林%廖大清%周总光%陈珂玲
鄭雪蓮%嚴茂林%廖大清%週總光%陳珂玲
정설련%엄무림%료대청%주총광%진가령
联合酶%枯否氏细胞%分离%BALB/c%鼠
聯閤酶%枯否氏細胞%分離%BALB/c%鼠
연합매%고부씨세포%분리%BALB/c%서
目的 用作用功效不同的酶联合消化分离 BALB/c 鼠枯否氏细胞(KC),建立简便易行,产量、活性,纯度较稳定的 KC 分离培养方法.方法 将0.1%Ⅳ型胶原酶、0.2%链霉蛋白酶、0.01%Dnase Ⅰ酶按1:1:1比例混合原位灌注和离体消化肝组织,经 Percoll 梯度离心,贴壁培养纯化细胞,应用荧光显微镜观察、免疫组织化学染色、吞噬功能实验进行鉴定.结果 KC获得率为(2～3)×106/鼠肝,细胞存活率达 96%,免疫组化和吞噬实验鉴定细胞纯度达 92%.KC 贴壁后形态大小不规则,呈多角形或星形,免疫组织化学染色显示溶菌酶阳性,胞浆内见吞噬的碳素墨汁颗粒.结论 用作用功效不同的酶联合消化KC,经梯度离心和贴壁培养,可获得高产量、高活性、高纯度的 BALB/c 鼠 KC,为进一步研究KC在肝脏疾病中的作用提供可靠的细胞来源.
目的 用作用功效不同的酶聯閤消化分離 BALB/c 鼠枯否氏細胞(KC),建立簡便易行,產量、活性,純度較穩定的 KC 分離培養方法.方法 將0.1%Ⅳ型膠原酶、0.2%鏈黴蛋白酶、0.01%Dnase Ⅰ酶按1:1:1比例混閤原位灌註和離體消化肝組織,經 Percoll 梯度離心,貼壁培養純化細胞,應用熒光顯微鏡觀察、免疫組織化學染色、吞噬功能實驗進行鑒定.結果 KC穫得率為(2～3)×106/鼠肝,細胞存活率達 96%,免疫組化和吞噬實驗鑒定細胞純度達 92%.KC 貼壁後形態大小不規則,呈多角形或星形,免疫組織化學染色顯示溶菌酶暘性,胞漿內見吞噬的碳素墨汁顆粒.結論 用作用功效不同的酶聯閤消化KC,經梯度離心和貼壁培養,可穫得高產量、高活性、高純度的 BALB/c 鼠 KC,為進一步研究KC在肝髒疾病中的作用提供可靠的細胞來源.
목적 용작용공효불동적매연합소화분리 BALB/c 서고부씨세포(KC),건립간편역행,산량、활성,순도교은정적 KC 분리배양방법.방법 장0.1%Ⅳ형효원매、0.2%련매단백매、0.01%Dnase Ⅰ매안1:1:1비례혼합원위관주화리체소화간조직,경 Percoll 제도리심,첩벽배양순화세포,응용형광현미경관찰、면역조직화학염색、탄서공능실험진행감정.결과 KC획득솔위(2～3)×106/서간,세포존활솔체 96%,면역조화화탄서실험감정세포순도체 92%.KC 첩벽후형태대소불규칙,정다각형혹성형,면역조직화학염색현시용균매양성,포장내견탄서적탄소묵즙과립.결론 용작용공효불동적매연합소화KC,경제도리심화첩벽배양,가획득고산량、고활성、고순도적 BALB/c 서 KC,위진일보연구KC재간장질병중적작용제공가고적세포래원.
