CAJ | 학술논문

目的寻找胰腺干细胞扩增方法,为研究糖尿病的细胞治疗提供种子细胞.方法无菌采集胎猪胰腺,经胰酶消化,以含10%血清的RPMI1640培养基培养.细胞长满皿底85%时,用胰酶消化传代,传代5～6次后细胞活力下降,细胞大量死亡漂浮,留下少数贴壁的小圆细胞.将培养基中的血清浓度提高到15%,贴壁的小圆细胞能快速增殖并形成细胞克隆,4～6d便可融汇成单层.采用免疫组织化学方法对所获得的的细胞进行胰腺干细胞特征检测.结果经上述方法处理的细胞具有旺盛的增殖能力,可以连续传代,目前已传至64代.采用免疫组织化学检测细胞表达胰腺干细胞特征性标志物,胰肠同源域因子1(PDX-1)、葡萄糖转运子2(GLUT-2)、巢蛋白、波形蛋白;经诱导后细胞表达胰腺内分泌细胞的标志为胰高血糖素、胰岛素、生长抑索、胰多肽.结论通过该方法可以获得大规模扩增的胰腺干细胞,该细胞在体外诱导可分化形成胰腺内分泌部4种主要细胞.
목적 심조이선간세포확증방법,위연구당뇨병적세포치료제공충자세포.방법무균채집태저이선,경이매소화,이함10%혈청적RPMI1640배양기배양.세포장만명저85%시,용이매소화전대,전대5～6차후세포활력하강,세포대량사망표부,류하소수첩벽적소원세포.장배양기중적혈청농도제고도15%,첩벽적소원세포능쾌속증식병형성세포극륭,4～6d편가융회성단층.채용면역조직화학방법대소획득적적세포진행이선간세포특정검측.결과경상술방법처리적세포구유왕성적증식능력,가이련속전대,목전이전지64대.채용면역조직화학검측세포표체이선간세포특정성표지물,이장동원역인자1(PDX-1)、포도당전운자2(GLUT-2)、소단백、파형단백;경유도후세포표체이선내분비세포적표지위이고혈당소、이도소、생장억색、이다태.결론통과해방법가이획득대규모확증적이선간세포,해세포재체외유도가분화형성이선내분비부4충주요세포.