CAJ | 학술논문

目的:研究不同分泌信号对豹蛙酶(ONC)在巴斯德毕赤酵母中分泌效率的影响.方法:根据已知天然ONC的氨基酸序列,结合酵母偏爱密码子,设计并合成了ONC基因序列,通过融合PCR获得了不同分泌信号与ONC的融合基因,将其克隆至表达载体pPIC9k中,然后将线性化的重组表达载体电击转化GS115毕赤酵母感受态细胞,通过SDS-PAGE检测目的蛋白表达量.结果:糖基化ONC表观相对分子质量为(14～16)×103,且其糖基化不均匀,非糖基化蛋白肽链的相对分子质量约为12×103;采用不合EAEA结构的α交配因子作为分泌信号时ONC没有表达,利用含EAEA结构的α交配因子和α交配因子的pre肽作为分泌信号时均能够显著提高其表达量.结论:采用含EAEA结构的α交配因子和α交配因子的pre肽作为分泌信号均能够显著提高ONC在巴斯德毕赤酵母中的表达量.
목적:연구불동분비신호대표와매(ONC)재파사덕필적효모중분비효솔적영향.방법:근거이지천연ONC적안기산서렬,결합효모편애밀마자,설계병합성료ONC기인서렬,통과융합PCR획득료불동분비신호여ONC적융합기인,장기극륭지표체재체pPIC9k중,연후장선성화적중조표체재체전격전화GS115필적효모감수태세포,통과SDS-PAGE검측목적단백표체량.결과:당기화ONC표관상대분자질량위(14～16)×103,차기당기화불균균,비당기화단백태련적상대분자질량약위12×103;채용불합EAEA결구적α교배인자작위분비신호시ONC몰유표체,이용함EAEA결구적α교배인자화α교배인자적pre태작위분비신호시균능구현저제고기표체량.결론:채용함EAEA결구적α교배인자화α교배인자적pre태작위분비신호균능구현저제고ONC재파사덕필적효모중적표체량.