中南民族大学学报(自然科学版)
中南民族大學學報(自然科學版)
중남민족대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SOUTH-CENTRAL UNIVERSITY FOR NATIONALITIES(NATURAL SCIENCE EDITION)
2010年
1期
22-27
,共6页
沈静茹%靳光才%余学红%韦康%林敏
瀋靜茹%靳光纔%餘學紅%韋康%林敏
침정여%근광재%여학홍%위강%림민
蛋白分离%纯化%液-固萃取%恒波长同步荧光
蛋白分離%純化%液-固萃取%恆波長同步熒光
단백분리%순화%액-고췌취%항파장동보형광
培养了含六聚组氨酸绿色荧光蛋白修饰融合蛋白的工程菌,对从工程菌中收集的蛋白原液用普通荧光和恒波长同步荧光2种荧光表征方式进行了比较,探究了分离蛋白的液固萃取体系中各因素(如硫酸铵浓度、吐温80浓度、酸度)对蛋白质荧光特性的影响,确定了萃取体系中适用的恒波长同步荧光测定法.运用该法得到液相的工作曲线线性相关系数达0.999 35,固相工作曲线线性相关系数为0.997 48,原始吐温80-硫酸铵液固萃取体系分离菌中目标蛋白,一次萃取固相收得率可达41.31 %,调节pH6.2时一次萃取固相收得率可达63.24%,进一步提高选择性,加入聚乙二醇修饰物可提高至93.50 %.
培養瞭含六聚組氨痠綠色熒光蛋白脩飾融閤蛋白的工程菌,對從工程菌中收集的蛋白原液用普通熒光和恆波長同步熒光2種熒光錶徵方式進行瞭比較,探究瞭分離蛋白的液固萃取體繫中各因素(如硫痠銨濃度、吐溫80濃度、痠度)對蛋白質熒光特性的影響,確定瞭萃取體繫中適用的恆波長同步熒光測定法.運用該法得到液相的工作麯線線性相關繫數達0.999 35,固相工作麯線線性相關繫數為0.997 48,原始吐溫80-硫痠銨液固萃取體繫分離菌中目標蛋白,一次萃取固相收得率可達41.31 %,調節pH6.2時一次萃取固相收得率可達63.24%,進一步提高選擇性,加入聚乙二醇脩飾物可提高至93.50 %.
배양료함륙취조안산록색형광단백수식융합단백적공정균,대종공정균중수집적단백원액용보통형광화항파장동보형광2충형광표정방식진행료비교,탐구료분리단백적액고췌취체계중각인소(여류산안농도、토온80농도、산도)대단백질형광특성적영향,학정료췌취체계중괄용적항파장동보형광측정법.운용해법득도액상적공작곡선선성상관계수체0.999 35,고상공작곡선선성상관계수위0.997 48,원시토온80-류산안액고췌취체계분리균중목표단백,일차췌취고상수득솔가체41.31 %,조절pH6.2시일차췌취고상수득솔가체63.24%,진일보제고선택성,가입취을이순수식물가제고지93.50 %.