物理化学学报
物理化學學報
물이화학학보
ACTA PHYSICO-CHIMICA SINICA
2010年
10期
2821-2827
,共7页
周稳稳%廉洁%胡科家%高云华%徐百
週穩穩%廉潔%鬍科傢%高雲華%徐百
주은은%렴길%호과가%고운화%서백
蛋白质芯片%抗体固定%夹心反应%酶联免疫吸附分析%氨基表面%戊二醛%多聚赖氨酸
蛋白質芯片%抗體固定%夾心反應%酶聯免疫吸附分析%氨基錶麵%戊二醛%多聚賴氨痠
단백질심편%항체고정%협심반응%매련면역흡부분석%안기표면%무이철%다취뢰안산
制备蛋白质芯片的关键在于将蛋白质固定到芯片表面并保持其生物学活性.本实验中,我们分别采用物理吸附、直接化学固定、加入间隔臂化学固定和生物亲和作用固定的方法将癌胚抗原(CEA)抗体固定到硅基芯片的二氧化硅表面.基于抗原-抗体的特异性相互作用,利用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)评价各种方法固定抗体的效果.实验结果表明,在修饰有氨基的表面采用戊二醛作为偶联试剂固定CEA抗体具有最高的偶联效率,引入多聚赖氨酸(poly-L-lysine)作为间隔臂可以显著增强固定效果,并可进一步降低非特异性吸附.而利用生物亲和作用固定CEA抗体也町获得较好的固定效果,但是非特异性吸附较严重.
製備蛋白質芯片的關鍵在于將蛋白質固定到芯片錶麵併保持其生物學活性.本實驗中,我們分彆採用物理吸附、直接化學固定、加入間隔臂化學固定和生物親和作用固定的方法將癌胚抗原(CEA)抗體固定到硅基芯片的二氧化硅錶麵.基于抗原-抗體的特異性相互作用,利用雙抗體夾心酶聯免疫法(ELISA)評價各種方法固定抗體的效果.實驗結果錶明,在脩飾有氨基的錶麵採用戊二醛作為偶聯試劑固定CEA抗體具有最高的偶聯效率,引入多聚賴氨痠(poly-L-lysine)作為間隔臂可以顯著增彊固定效果,併可進一步降低非特異性吸附.而利用生物親和作用固定CEA抗體也町穫得較好的固定效果,但是非特異性吸附較嚴重.
제비단백질심편적관건재우장단백질고정도심편표면병보지기생물학활성.본실험중,아문분별채용물리흡부、직접화학고정、가입간격비화학고정화생물친화작용고정적방법장암배항원(CEA)항체고정도규기심편적이양화규표면.기우항원-항체적특이성상호작용,이용쌍항체협심매련면역법(ELISA)평개각충방법고정항체적효과.실험결과표명,재수식유안기적표면채용무이철작위우련시제고정CEA항체구유최고적우련효솔,인입다취뢰안산(poly-L-lysine)작위간격비가이현저증강고정효과,병가진일보강저비특이성흡부.이이용생물친화작용고정CEA항체야정획득교호적고정효과,단시비특이성흡부교엄중.
