中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2011年
4期
311-315
,共5页
纪蕾%韩建康%吴晓芳%徐德顺%邱妤怡%陈莉萍%沈月华%查赟峰
紀蕾%韓建康%吳曉芳%徐德順%邱妤怡%陳莉萍%瀋月華%查赟峰
기뢰%한건강%오효방%서덕순%구여이%진리평%침월화%사빈봉
诺如病毒%多重荧光RT-PCR%检测%GⅠ型%GⅡ型
諾如病毒%多重熒光RT-PCR%檢測%GⅠ型%GⅡ型
낙여병독%다중형광RT-PCR%검측%GⅠ형%GⅡ형
目的 建立可同时检测GⅠ型和GⅡ型诺如病毒的双重荧光RT-PCR快速检测方法,并应用于临床标本的检测.方法 使用针对GⅠ型和GⅡ型诺如病毒各亚型代表株保守序列设计的特异性引物和TaqMan探针,通过调整引物、探针浓度优化最佳反应条件,建立一步法荧光RT-PCR快速检测反应体系.对该方法的灵敏度、特异性、稳定性进行评估,并对临床粪便标本进行检测,与已有的单重荧光RT-PCR方法进行比较.结果 实验结果表明,该检测方法特异性强,对GⅠ型、GⅡ型诺如病毒、轮状病毒、肠道腺病毒、甲型肝炎病毒进行检测,均无交叉反应;对GⅠ型和GⅡ型诺如病毒核酸的最低检出限分别可达1pg/mL和10pg/mL,并且重复性好;对101份临床标本分别用已有的单重荧光RT-PCR和本文建立的多重荧光RT-PCR进行检测,结果显示本文建立的多重荧光RT-PCR方法对GI型诺如病毒的检测能力优于前者.结论 本研究建立的多重荧光RT-PCR方法能同时对GⅠ型和GⅡ型诺如病毒进行快速检测,并且灵敏度高,特异性好,可用于感染性腹泻暴发中诺如病毒的快速检测.
目的 建立可同時檢測GⅠ型和GⅡ型諾如病毒的雙重熒光RT-PCR快速檢測方法,併應用于臨床標本的檢測.方法 使用針對GⅠ型和GⅡ型諾如病毒各亞型代錶株保守序列設計的特異性引物和TaqMan探針,通過調整引物、探針濃度優化最佳反應條件,建立一步法熒光RT-PCR快速檢測反應體繫.對該方法的靈敏度、特異性、穩定性進行評估,併對臨床糞便標本進行檢測,與已有的單重熒光RT-PCR方法進行比較.結果 實驗結果錶明,該檢測方法特異性彊,對GⅠ型、GⅡ型諾如病毒、輪狀病毒、腸道腺病毒、甲型肝炎病毒進行檢測,均無交扠反應;對GⅠ型和GⅡ型諾如病毒覈痠的最低檢齣限分彆可達1pg/mL和10pg/mL,併且重複性好;對101份臨床標本分彆用已有的單重熒光RT-PCR和本文建立的多重熒光RT-PCR進行檢測,結果顯示本文建立的多重熒光RT-PCR方法對GI型諾如病毒的檢測能力優于前者.結論 本研究建立的多重熒光RT-PCR方法能同時對GⅠ型和GⅡ型諾如病毒進行快速檢測,併且靈敏度高,特異性好,可用于感染性腹瀉暴髮中諾如病毒的快速檢測.
목적 건립가동시검측GⅠ형화GⅡ형낙여병독적쌍중형광RT-PCR쾌속검측방법,병응용우림상표본적검측.방법 사용침대GⅠ형화GⅡ형낙여병독각아형대표주보수서렬설계적특이성인물화TaqMan탐침,통과조정인물、탐침농도우화최가반응조건,건립일보법형광RT-PCR쾌속검측반응체계.대해방법적령민도、특이성、은정성진행평고,병대림상분편표본진행검측,여이유적단중형광RT-PCR방법진행비교.결과 실험결과표명,해검측방법특이성강,대GⅠ형、GⅡ형낙여병독、륜상병독、장도선병독、갑형간염병독진행검측,균무교차반응;대GⅠ형화GⅡ형낙여병독핵산적최저검출한분별가체1pg/mL화10pg/mL,병차중복성호;대101빈림상표본분별용이유적단중형광RT-PCR화본문건립적다중형광RT-PCR진행검측,결과현시본문건립적다중형광RT-PCR방법대GI형낙여병독적검측능력우우전자.결론 본연구건립적다중형광RT-PCR방법능동시대GⅠ형화GⅡ형낙여병독진행쾌속검측,병차령민도고,특이성호,가용우감염성복사폭발중낙여병독적쾌속검측.
