口腔医学
口腔醫學
구강의학
STOMATOLOGY
2011年
10期
588-591
,共4页
杜一飞%周薇娜%江飞%袁华
杜一飛%週薇娜%江飛%袁華
두일비%주미나%강비%원화
E2F-1%shRNA%环氧化酶-2
E2F-1%shRNA%環氧化酶-2
E2F-1%shRNA%배양화매-2
目的 探讨核转录因子E2F -1基因沉默对舌鳞癌细胞环氧化酶-2(COX -2)基因表达的影响.方法 体外合成靶向E2F -1基因的短发卡状RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列,克隆到pLKO.1 - PURO - U6( Age Ⅰ/EcoR Ⅰ)质粒载体中,经酶切和测序鉴定所构建的重组载体,将以上质粒分别和包装质粒混合物共转染293T细胞,包装产生病毒颗粒.将病毒载体转染舌鳞癌细胞Tca8113细胞后,运用Real - Time PCR和Western - blot检测E2F -1和COX -2基因的表达.结果 经酶切和测序证明,靶向E2F -1基因的shRNA序列正确；转染组E2F-1和COX -2基因mRNA和蛋白表达均发生明显下调,与空白对照组相比,差异有统计学意义,阴性对照组未见明显差异.结论 靶向E2F-1基因的shRNA慢病毒载体可特异性沉默E2F-1基因的表达；E2F-1基因沉默后可下调COX -2基因表达.
目的 探討覈轉錄因子E2F -1基因沉默對舌鱗癌細胞環氧化酶-2(COX -2)基因錶達的影響.方法 體外閤成靶嚮E2F -1基因的短髮卡狀RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列,剋隆到pLKO.1 - PURO - U6( Age Ⅰ/EcoR Ⅰ)質粒載體中,經酶切和測序鑒定所構建的重組載體,將以上質粒分彆和包裝質粒混閤物共轉染293T細胞,包裝產生病毒顆粒.將病毒載體轉染舌鱗癌細胞Tca8113細胞後,運用Real - Time PCR和Western - blot檢測E2F -1和COX -2基因的錶達.結果 經酶切和測序證明,靶嚮E2F -1基因的shRNA序列正確；轉染組E2F-1和COX -2基因mRNA和蛋白錶達均髮生明顯下調,與空白對照組相比,差異有統計學意義,陰性對照組未見明顯差異.結論 靶嚮E2F-1基因的shRNA慢病毒載體可特異性沉默E2F-1基因的錶達；E2F-1基因沉默後可下調COX -2基因錶達.
목적 탐토핵전록인자E2F -1기인침묵대설린암세포배양화매-2(COX -2)기인표체적영향.방법 체외합성파향E2F -1기인적단발잡상RNA(short hairpin RNA,shRNA)서렬,극륭도pLKO.1 - PURO - U6( Age Ⅰ/EcoR Ⅰ)질립재체중,경매절화측서감정소구건적중조재체,장이상질립분별화포장질립혼합물공전염293T세포,포장산생병독과립.장병독재체전염설린암세포Tca8113세포후,운용Real - Time PCR화Western - blot검측E2F -1화COX -2기인적표체.결과 경매절화측서증명,파향E2F -1기인적shRNA서렬정학；전염조E2F-1화COX -2기인mRNA화단백표체균발생명현하조,여공백대조조상비,차이유통계학의의,음성대조조미견명현차이.결론 파향E2F-1기인적shRNA만병독재체가특이성침묵E2F-1기인적표체；E2F-1기인침묵후가하조COX -2기인표체.
