首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2012年
2期
182-186
,共5页
李冉%王勇%宫晓丽%范明%王晓民%朱玲玲%汪璇
李冉%王勇%宮曉麗%範明%王曉民%硃玲玲%汪璇
리염%왕용%궁효려%범명%왕효민%주령령%왕선
低氧%低氧诱导因子1α%PC12细胞%棘霉素
低氧%低氧誘導因子1α%PC12細胞%棘黴素
저양%저양유도인자1α%PC12세포%극매소
目的 通过抑制低氧诱导因子-1α转录活性,研究低氧诱导因子-1α在低氧诱导的细胞死亡中的作用.方法 ①将PC12细胞接种于12孔板,在20%常氧和3%低氧环境中培养24h,在光镜下拍照并应用计数方法记录PC12细胞的生长情况.②将PC12细胞接种于96孔板,在常氧和低氧环境中培养24h后,用细胞活力检测剂(a novel tetrazolium compound,3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl) -2- (4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium inner salt,MTS)检测PC12细胞的生长情况.③在常氧和低氧条件下分别用5 nmol/L、50 nmol/L、500 nmol/L的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞24 h和48 h后,用MTS法检测细胞活力.结果 ①细胞计数和MTS法检测细胞活力的结果均显示3%的低氧条件可明显诱导PC12细胞死亡.②不同浓度的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞24h之后,低氧和常氧的细胞活力没有显著区别.③不同浓度的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞48 h之后,低氧不再促进细胞死亡,相反,低氧条件处理的细胞活力明显好于常氧.结论 低氧会促使PC12细胞死亡,棘霉素抑制HIF-1α的转录活性24h后,低氧对PC12细胞的促死亡作用减弱;48 h后,低氧组的细胞活力还可超过常氧组.这表明,低氧下过量的HIF-1α转录激活对细胞是有害的.
目的 通過抑製低氧誘導因子-1α轉錄活性,研究低氧誘導因子-1α在低氧誘導的細胞死亡中的作用.方法 ①將PC12細胞接種于12孔闆,在20%常氧和3%低氧環境中培養24h,在光鏡下拍照併應用計數方法記錄PC12細胞的生長情況.②將PC12細胞接種于96孔闆,在常氧和低氧環境中培養24h後,用細胞活力檢測劑(a novel tetrazolium compound,3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl) -2- (4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium inner salt,MTS)檢測PC12細胞的生長情況.③在常氧和低氧條件下分彆用5 nmol/L、50 nmol/L、500 nmol/L的低氧誘導因子-1α抑製劑棘黴素處理PC12細胞24 h和48 h後,用MTS法檢測細胞活力.結果 ①細胞計數和MTS法檢測細胞活力的結果均顯示3%的低氧條件可明顯誘導PC12細胞死亡.②不同濃度的低氧誘導因子-1α抑製劑棘黴素處理PC12細胞24h之後,低氧和常氧的細胞活力沒有顯著區彆.③不同濃度的低氧誘導因子-1α抑製劑棘黴素處理PC12細胞48 h之後,低氧不再促進細胞死亡,相反,低氧條件處理的細胞活力明顯好于常氧.結論 低氧會促使PC12細胞死亡,棘黴素抑製HIF-1α的轉錄活性24h後,低氧對PC12細胞的促死亡作用減弱;48 h後,低氧組的細胞活力還可超過常氧組.這錶明,低氧下過量的HIF-1α轉錄激活對細胞是有害的.
목적 통과억제저양유도인자-1α전록활성,연구저양유도인자-1α재저양유도적세포사망중적작용.방법 ①장PC12세포접충우12공판,재20%상양화3%저양배경중배양24h,재광경하박조병응용계수방법기록PC12세포적생장정황.②장PC12세포접충우96공판,재상양화저양배경중배양24h후,용세포활력검측제(a novel tetrazolium compound,3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl) -2- (4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium inner salt,MTS)검측PC12세포적생장정황.③재상양화저양조건하분별용5 nmol/L、50 nmol/L、500 nmol/L적저양유도인자-1α억제제극매소처리PC12세포24 h화48 h후,용MTS법검측세포활력.결과 ①세포계수화MTS법검측세포활력적결과균현시3%적저양조건가명현유도PC12세포사망.②불동농도적저양유도인자-1α억제제극매소처리PC12세포24h지후,저양화상양적세포활력몰유현저구별.③불동농도적저양유도인자-1α억제제극매소처리PC12세포48 h지후,저양불재촉진세포사망,상반,저양조건처리적세포활력명현호우상양.결론 저양회촉사PC12세포사망,극매소억제HIF-1α적전록활성24h후,저양대PC12세포적촉사망작용감약;48 h후,저양조적세포활력환가초과상양조.저표명,저양하과량적HIF-1α전록격활대세포시유해적.