中国防痨杂志
中國防癆雜誌
중국방로잡지
BULLETIN OF THE CHINESE ANTITUBERCULOSIS ASSOCIATION
2012年
3期
145-149
,共5页
王平%王丽梅%张薇%柏银兰%康健%郝彦斐%罗泰来%徐志凯
王平%王麗梅%張薇%柏銀蘭%康健%郝彥斐%囉泰來%徐誌凱
왕평%왕려매%장미%백은란%강건%학언비%라태래%서지개
分枝杆菌,耻垢%重组融合蛋白质类%结核菌苗%免疫活性
分枝桿菌,恥垢%重組融閤蛋白質類%結覈菌苗%免疫活性
분지간균,치구%중조융합단백질류%결핵균묘%면역활성
目的 评价表达Mtb Ag85B ESAT-6融合蛋白的莺组耻垢分枝杆菌(Ag85B-ESAT-6-rM.s)在小鼠中的免疫原性.方法 6周龄BALB/c小鼠经背部皮下注射1×106 CFU(colony-forming unit,菌落形成单位)的Ag85B-ESAT-6-rM.s,同时设M.s免疫组(10只)、B[CG免疫组(10只)、Ag85B-ESAT-6融合蛋白免疫组(10只)和生理盐水组(10只).接种免疫后1～6周,尾静脉采血,检测小鼠外周血CD4+和CD8+T细胞所占百分比；免疫后6周,MTS[ 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl )-2 H-tetrazolium,inner salt]法检测小鼠脾淋巴细胞增殖和酶联免疫斑点检测(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)检测脾淋巴细胞分泌γ干扰素(interferon γ,IFN-γ)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)和白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)等细胞因子的水平.结果 Ag85B-ESAT-6-rM.s免疫小鼠后能够明显刺激小鼠外周血CD4+和CD8+T细胞的产生,其所占百分比[(59.6±1.5)％]明显高于BCG免疫组[(48.8±2.3)％](t=12.252,P＜0.05)和原始M.s免疫组[(45.7±1.6)％](t=20.166,P＜0.05).Ag85B- ESAT-6-rM.s免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖指数(3.23±0.31)与BCG免疫刺激的增殖指数(2.95±0.36)相当(t=1.864,P＞0.05),但其诱生IFN-γ的能力[斑点形成细胞(spot forming cells,SFC)][(167.5±36.6)SFC/106]明显高于BCG[(98.5±26.9)SFC/106](t=4.804,P＜0.05).结论 Ag85B-ESAT-6融合蛋白在耻垢分枝杆菌中的表达能够明显提高M.s的免疫原性,并能够刺激小鼠机体产生有利于抗Mtb感染的免疫反应,作为TB新型候选疫苗具有一定的研究前景.
目的 評價錶達Mtb Ag85B ESAT-6融閤蛋白的鶯組恥垢分枝桿菌(Ag85B-ESAT-6-rM.s)在小鼠中的免疫原性.方法 6週齡BALB/c小鼠經揹部皮下註射1×106 CFU(colony-forming unit,菌落形成單位)的Ag85B-ESAT-6-rM.s,同時設M.s免疫組(10隻)、B[CG免疫組(10隻)、Ag85B-ESAT-6融閤蛋白免疫組(10隻)和生理鹽水組(10隻).接種免疫後1～6週,尾靜脈採血,檢測小鼠外週血CD4+和CD8+T細胞所佔百分比；免疫後6週,MTS[ 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl )-2 H-tetrazolium,inner salt]法檢測小鼠脾淋巴細胞增殖和酶聯免疫斑點檢測(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)檢測脾淋巴細胞分泌γ榦擾素(interferon γ,IFN-γ)、白細胞介素-2(interleukin-2,IL-2)和白細胞介素-4(interleukin-4,IL-4)等細胞因子的水平.結果 Ag85B-ESAT-6-rM.s免疫小鼠後能夠明顯刺激小鼠外週血CD4+和CD8+T細胞的產生,其所佔百分比[(59.6±1.5)％]明顯高于BCG免疫組[(48.8±2.3)％](t=12.252,P＜0.05)和原始M.s免疫組[(45.7±1.6)％](t=20.166,P＜0.05).Ag85B- ESAT-6-rM.s免疫小鼠的脾淋巴細胞增殖指數(3.23±0.31)與BCG免疫刺激的增殖指數(2.95±0.36)相噹(t=1.864,P＞0.05),但其誘生IFN-γ的能力[斑點形成細胞(spot forming cells,SFC)][(167.5±36.6)SFC/106]明顯高于BCG[(98.5±26.9)SFC/106](t=4.804,P＜0.05).結論 Ag85B-ESAT-6融閤蛋白在恥垢分枝桿菌中的錶達能夠明顯提高M.s的免疫原性,併能夠刺激小鼠機體產生有利于抗Mtb感染的免疫反應,作為TB新型候選疫苗具有一定的研究前景.
목적 평개표체Mtb Ag85B ESAT-6융합단백적앵조치구분지간균(Ag85B-ESAT-6-rM.s)재소서중적면역원성.방법 6주령BALB/c소서경배부피하주사1×106 CFU(colony-forming unit,균락형성단위)적Ag85B-ESAT-6-rM.s,동시설M.s면역조(10지)、B[CG면역조(10지)、Ag85B-ESAT-6융합단백면역조(10지)화생리염수조(10지).접충면역후1～6주,미정맥채혈,검측소서외주혈CD4+화CD8+T세포소점백분비；면역후6주,MTS[ 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl )-2 H-tetrazolium,inner salt]법검측소서비림파세포증식화매련면역반점검측(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)검측비림파세포분비γ간우소(interferon γ,IFN-γ)、백세포개소-2(interleukin-2,IL-2)화백세포개소-4(interleukin-4,IL-4)등세포인자적수평.결과 Ag85B-ESAT-6-rM.s면역소서후능구명현자격소서외주혈CD4+화CD8+T세포적산생,기소점백분비[(59.6±1.5)％]명현고우BCG면역조[(48.8±2.3)％](t=12.252,P＜0.05)화원시M.s면역조[(45.7±1.6)％](t=20.166,P＜0.05).Ag85B- ESAT-6-rM.s면역소서적비림파세포증식지수(3.23±0.31)여BCG면역자격적증식지수(2.95±0.36)상당(t=1.864,P＞0.05),단기유생IFN-γ적능력[반점형성세포(spot forming cells,SFC)][(167.5±36.6)SFC/106]명현고우BCG[(98.5±26.9)SFC/106](t=4.804,P＜0.05).결론 Ag85B-ESAT-6융합단백재치구분지간균중적표체능구명현제고M.s적면역원성,병능구자격소서궤체산생유리우항Mtb감염적면역반응,작위TB신형후선역묘구유일정적연구전경.
