生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2012年
5期
126-131
,共6页
李广旭%陈华民%刘维振%吴静%吴茂森%何晨阳
李廣旭%陳華民%劉維振%吳靜%吳茂森%何晨暘
리엄욱%진화민%류유진%오정%오무삼%하신양
水稻%OsBTF3基因%RNA干扰%基因沉默%籽粒相关性状
水稻%OsBTF3基因%RNA榦擾%基因沉默%籽粒相關性狀
수도%OsBTF3기인%RNA간우%기인침묵%자립상관성상
为了创制OsBTF3基因沉默的水稻植株、验证该基因在水稻籽粒相关性状中的功能、评价其在水稻遗传改良中潜在的应用价值,设计和合成OsBTF3基因序列的引物、扩增部分基因片段,构建RNAi基因沉默载体、通过农杆菌介导转化愈伤组织、植株再生、潮霉素抗性筛选和PCR验证、定量分析OsBTF3基因表达量,测定转基因水稻籽粒相关性状.结果表明,成功地获得了20个T1代OsBTF3-RNAi转基因株系,OsBTF3基因表达量得到显著的抑制和干扰,抑制效果平均达到85％；与野生型对照株相比,5个所测定RNAi转基因株系的穗长、穗粒数、千粒重和穗粒重等籽粒相关性状明显地减小或降低.因此,RNAi介导的基因沉默导致了OsBTF3基因表达水平抑制以及在籽粒性状中的功能缺失；OsBTF3可能是一个调控水稻籽粒相关性状重要的功能基因.
為瞭創製OsBTF3基因沉默的水稻植株、驗證該基因在水稻籽粒相關性狀中的功能、評價其在水稻遺傳改良中潛在的應用價值,設計和閤成OsBTF3基因序列的引物、擴增部分基因片段,構建RNAi基因沉默載體、通過農桿菌介導轉化愈傷組織、植株再生、潮黴素抗性篩選和PCR驗證、定量分析OsBTF3基因錶達量,測定轉基因水稻籽粒相關性狀.結果錶明,成功地穫得瞭20箇T1代OsBTF3-RNAi轉基因株繫,OsBTF3基因錶達量得到顯著的抑製和榦擾,抑製效果平均達到85％；與野生型對照株相比,5箇所測定RNAi轉基因株繫的穗長、穗粒數、韆粒重和穗粒重等籽粒相關性狀明顯地減小或降低.因此,RNAi介導的基因沉默導緻瞭OsBTF3基因錶達水平抑製以及在籽粒性狀中的功能缺失；OsBTF3可能是一箇調控水稻籽粒相關性狀重要的功能基因.
위료창제OsBTF3기인침묵적수도식주、험증해기인재수도자립상관성상중적공능、평개기재수도유전개량중잠재적응용개치,설계화합성OsBTF3기인서렬적인물、확증부분기인편단,구건RNAi기인침묵재체、통과농간균개도전화유상조직、식주재생、조매소항성사선화PCR험증、정량분석OsBTF3기인표체량,측정전기인수도자립상관성상.결과표명,성공지획득료20개T1대OsBTF3-RNAi전기인주계,OsBTF3기인표체량득도현저적억제화간우,억제효과평균체도85％；여야생형대조주상비,5개소측정RNAi전기인주계적수장、수립수、천립중화수립중등자립상관성상명현지감소혹강저.인차,RNAi개도적기인침묵도치료OsBTF3기인표체수평억제이급재자립성상중적공능결실；OsBTF3가능시일개조공수도자립상관성상중요적공능기인.
