中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2012年
3期
187-190
,共4页
李辉%陈思%马娇颖%戴君%谢光蓉%陈建华
李輝%陳思%馬嬌穎%戴君%謝光蓉%陳建華
리휘%진사%마교영%대군%사광용%진건화
芽孢杆菌,枯草%尿酸氧化酶%高尿酸血症%分泌表达
芽孢桿菌,枯草%尿痠氧化酶%高尿痠血癥%分泌錶達
아포간균,고초%뇨산양화매%고뇨산혈증%분비표체
目的 构建重组枯草芽孢杆菌猪尿酸氧化酶基因工程菌及其目的 蛋白的分泌表达,并对其酶活性进行测定.方法 从 pET-22b/pUOX 重组质粒上 PCR 获得 pUOX基因,然后通过重叠延伸 PCR 技术将 pUOX 与一段 nprB信号肽基因相连,导入穿梭载体 pP43X,构建重组载体pP43X/pUOX,运用化学转化法转化枯草芽孢杆菌 WB800中.结果 发酵表达后胞外分泌液经 SDS-PAGE 检测,在约34 kD 处有一清晰蛋白条带,这与预期分子量一致.发酵液中该重组蛋白的酶活力达 2.322 U/ml.结论 成功构建重组枯草芽孢杆菌猪尿酸氧化酶基因工程菌,目的 蛋白分泌表达并具有较高活性.
目的 構建重組枯草芽孢桿菌豬尿痠氧化酶基因工程菌及其目的 蛋白的分泌錶達,併對其酶活性進行測定.方法 從 pET-22b/pUOX 重組質粒上 PCR 穫得 pUOX基因,然後通過重疊延伸 PCR 技術將 pUOX 與一段 nprB信號肽基因相連,導入穿梭載體 pP43X,構建重組載體pP43X/pUOX,運用化學轉化法轉化枯草芽孢桿菌 WB800中.結果 髮酵錶達後胞外分泌液經 SDS-PAGE 檢測,在約34 kD 處有一清晰蛋白條帶,這與預期分子量一緻.髮酵液中該重組蛋白的酶活力達 2.322 U/ml.結論 成功構建重組枯草芽孢桿菌豬尿痠氧化酶基因工程菌,目的 蛋白分泌錶達併具有較高活性.
목적 구건중조고초아포간균저뇨산양화매기인공정균급기목적 단백적분비표체,병대기매활성진행측정.방법 종 pET-22b/pUOX 중조질립상 PCR 획득 pUOX기인,연후통과중첩연신 PCR 기술장 pUOX 여일단 nprB신호태기인상련,도입천사재체 pP43X,구건중조재체pP43X/pUOX,운용화학전화법전화고초아포간균 WB800중.결과 발효표체후포외분비액경 SDS-PAGE 검측,재약34 kD 처유일청석단백조대,저여예기분자량일치.발효액중해중조단백적매활력체 2.322 U/ml.결론 성공구건중조고초아포간균저뇨산양화매기인공정균,목적 단백분비표체병구유교고활성.
